脉冲场电泳分型测试

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2025-12-27  

脉冲场电泳分型测试是一种用于大分子DNA分离与分析的高分辨率分子分型技术。该技术通过交替变换电场方向,有效分离几十kb至数Mb大小的DNA片段。检测过程涵盖基因组DNA制备、酶切消化、电泳条件优化及条带图谱分析等关键环节,其结果对于病原体溯源、基因作图及遗传多样性研究具有决定性作用。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

基因组DNA完整性评估:通过琼脂糖凝胶电泳初步检测DNA样本的完整性与纯度,确保DNA分子量足够大且无降解,满足脉冲场电泳对起始材料的要求。

DNA浓度与纯度精确测定:采用紫外分光光度法或荧光染料法对DNA样本进行定量分析,确保其浓度与纯度在最佳范围内,以避免后续酶切反应效率低下。

稀有切割限制性内切酶酶切:使用识别位点罕见的限制性内切酶对基因组DNA进行完全消化,产生数量适中、大小在几十至数百kb之间的线性DNA片段。

琼脂糖凝胶块包埋样本制备:将酶切后的DNA样本均匀包埋于低熔点琼脂糖凝胶块中,以保护大分子DNA在后续操作过程中免受机械剪切力的破坏。

脉冲场电泳参数优化:根据待分离DNA片段的大小范围,系统优化脉冲时间、电场强度、电场角度及缓冲液温度等关键电泳参数,以实现最佳分离效果。

DNA分子量标准品同步电泳:将已知大小的DNA分子量标准品与待测样本在同一块凝胶上进行电泳,为后续样品条带大小的精确判定提供参照依据。

凝胶染色与成像分析:电泳结束后使用高灵敏度荧光染料对凝胶中的DNA条带进行染色,并通过紫外或蓝光成像系统捕获清晰的条带图谱。

指纹图谱数字化与归一化处理:将获得的条带图谱转化为数字化数据,并进行背景扣除和信号强度归一化处理,以提高不同批次实验结果的可比性。

菌株间遗传相关性分析:基于数字化指纹图谱,通过聚类分析或主成分分析等生物信息学方法,计算不同菌株或个体之间的遗传相似性系数。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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