蛋白质纯度电泳仪分析

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2026-06-29  

本检测详细阐述了利用电泳技术进行蛋白质纯度分析的核心内容。本检测系统性地介绍了相关的检测项目、适用范围、主流方法及关键仪器设备,旨在为生物化学、分子生物学及生物制药领域的科研与质控人员提供一份全面的技术参考。通过电泳分析,可以有效评估蛋白质样品的纯度、均一性及完整性,是蛋白质研究中的基础且关键的环节。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

总蛋白纯度:评估目标蛋白在总蛋白样品中所占的百分比,是衡量纯化效果的核心指标。

杂质蛋白鉴定:识别并分析样品中存在的非目标宿主蛋白、酶或其它污染性蛋白质。

蛋白质片段化分析:检测目标蛋白是否发生降解,形成分子量较小的片段。

多聚体与聚集物分析:检测样品中是否存在由目标蛋白形成的二聚体、多聚体或不溶性聚集体。

电荷异质性:分析因翻译后修饰(如脱酰胺、糖基化)或降解导致的蛋白质电荷变体。

二硫键完整性:通过还原与非还原条件对比,评估蛋白质分子内或分子间二硫键的正确配对情况。

糖型初步分析:对于糖蛋白,可初步评估其糖基化修饰的均一性或异质性。

等电点测定:通过等电聚焦电泳确定蛋白质的等电点,用于表征其电荷属性。

分子量测定:通过与已知分子量标准品对比,精确测定目标蛋白的表观分子量。

批次间一致性比较:对比不同批次纯化的蛋白质样品,确保其纯度与条带模式的稳定性和重现性。

检测范围

重组蛋白药物:如单克隆抗体、细胞因子、激素等生物制剂的纯度与杂质监控。

酶制剂:用于工业催化或诊断试剂的高纯度酶的纯度验证。

疫苗产品:亚单位疫苗、病毒样颗粒疫苗中抗原蛋白的纯度与完整性分析。

细胞培养上清:评估分泌表达的目标蛋白在粗样品中的存在情况及大致纯度。

蛋白纯化中间品:在层析纯化各步骤后取样,跟踪目标蛋白的富集与杂质去除情况。

包涵体蛋白:分析变性溶解后的包涵体蛋白的组成及复性后的均一性。

血清/血浆蛋白:分离与分析血液中的特定蛋白组分,如白蛋白、免疫球蛋白等。

植物或动物组织提取蛋白:从复杂生物组织中提取的目标蛋白的纯度鉴定。

蛋白标记与偶联物:评估荧光标记、生物素化或药物偶联后蛋白产物的纯度与均一性。

科研级蛋白样品:实验室自制或商业购买的用于结构、功能研究的蛋白质的质量控制。

检测方法

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE):最常用的方法,在变性条件下根据分子量分离蛋白质,用于评估纯度和分子量。

非还原SDS-PAGE:在不加还原剂条件下进行,用于分析蛋白质的多聚体状态和二硫键连接方式。

天然PAGE:在非变性条件下进行,保持蛋白质的天然构象和活性,用于分析天然状态下的聚合情况。

Tris-甘氨酸系统电泳:经典的SDS-PAGE缓冲系统,适用于大多数蛋白质的分离。

Tris- Tricine系统电泳:优化用于分离小分子量多肽和蛋白质(1-100 kDa),分辨率更高。

等电聚焦电泳(IEF):根据蛋白质等电点的差异进行分离,专门用于分析电荷异质性。

双向电泳(2-DE)

SDS-PAGE考马斯亮蓝染色法

SDS-PAGE银染法

SDS-PAGE免疫印迹法(Western Blot)

检测仪器设备

垂直板凝胶电泳槽

水平板凝胶电泳槽

高压电源

凝胶成像系统

化学发光成像仪

激光扫描仪

凝胶染色与脱色摇床

制胶器与玻璃板

微量进样器与上样枪头

凝胶分析软件

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

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