代谢产物衍生化检测

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2026-07-06  

本检测系统阐述了代谢产物衍生化检测技术,这是一种通过化学修饰将难以直接分析的代谢物转化为易于检测的稳定衍生物的关键前处理手段。本检测详细介绍了该技术涵盖的核心检测项目、广泛的检测范围、主流的衍生化与分析方法以及必需的仪器设备,为理解代谢组学、临床诊断及生物标志物研究中的复杂代谢物分析提供了全面的技术视角。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

短链脂肪酸:通过酯化或硅烷化衍生,提高其挥发性和热稳定性,便于气相色谱分析。

氨基酸:采用邻苯二甲醛、芴甲氧羰酰氯等试剂衍生,引入紫外或荧光基团,增强检测灵敏度。

有机酸:如柠檬酸、琥珀酸等,常经甲酯化或硅烷化处理,以改善其在GC-MS中的色谱行为。

糖类物质:包括单糖、二糖,通过肟化、硅烷化或乙酰化衍生,降低极性,适应GC分析。

胺类与神经递质:如多巴胺、血清素,使用丹磺酰氯等试剂衍生,赋予其荧光特性,实现痕量检测。

固醇类激素:通过肟化、硅烷化两步衍生,掩蔽羟基和羰基,提高在质谱中的响应和特异性。

胆汁酸:常进行甲基化或硅烷化衍生,以降低其高沸点和强极性,便于色谱分离。

维生素:如水溶性B族维生素和脂溶性维生素D,衍生化旨在引入生色团或提高其稳定性。

核苷酸及其代谢物:通过化学修饰使其带上易于电离的基团,提升LC-MS/MS分析的离子化效率。

药物代谢产物:对含有羟基、氨基等官能团的代谢物进行衍生,以改善其分离度和检测限。

检测范围

生物体液分析:涵盖血液、尿液、脑脊液、唾液等样本中内源性及外源性代谢产物的检测。

细胞代谢组学:用于分析细胞内代谢通路的中间产物和终产物,揭示细胞功能状态。

植物次生代谢物:检测黄酮类、生物碱、酚酸等经过衍生化后更易分析的植物化学成分。

微生物发酵产物:监控发酵液中有机酸、醇类、抗生素前体等代谢物的动态变化。

食品安全与溯源:检测食品中真菌毒素、兽药残留的代谢标记物,进行安全评估和产地溯源。

环境毒理学研究:分析生物体暴露于环境污染物后产生的特征性代谢响应产物。

临床疾病标志物筛查:寻找并定量与癌症、代谢性疾病(如糖尿病)相关的特异性代谢物。

药物研发与药代动力学:追踪药物在体内的吸收、分布、代谢和排泄过程相关产物。

营养与代谢研究:评估营养素摄入后体内相关代谢通路产物的变化,研究营养状态。

法医毒物分析:对体液中的毒品及其代谢产物进行衍生化,实现高灵敏度和高特异性的鉴定。

检测方法

硅烷化衍生法:使用BSTFA、MSTFA等试剂,取代活性氢,适用于含-OH、-COOH、-NH2的化合物,是GC-MS最常用方法之一。

酰化衍生法:采用酸酐或酰卤试剂,将胺类、酚类转化为酰胺或酯,降低极性并改善峰形。

烷基化衍生法:如重氮甲烷甲酯化,主要用于羧酸的甲基化,反应快速但试剂有毒性。

荧光标记衍生法:使用丹磺酰氯、FMOCl等强荧光试剂,极大提高HPLC-FLD的检测灵敏度。

紫外标记衍生法:通过引入苯甲酰基等强紫外吸收基团,增强HPLC-UV的检测能力。

手性衍生法:使用手性衍生试剂,将手性代谢物转化为非对映异构体,便于在普通色谱柱上分离分析。

肟化反应:常针对酮基和醛基,先用甲氧胺盐酸盐处理,减少拖尾,再结合硅烷化进行全衍生。

电化学活性衍生法:赋予代谢产物电化学活性,使其适用于高效液相色谱-电化学检测器系统。

同位素标记衍生内标法:使用稳定同位素标记的衍生试剂,作为内标进行绝对定量,提高数据准确性。

在线自动衍生技术: 将衍生化装置与色谱仪器在线联用,实现自动化操作,提高重现性和通量。

检测仪器设备

<强气相色谱-质谱联用仪: 是硅烷化、烷基化等挥发性衍生物分析的黄金标准设备,提供高分辨分离和结构信息。

<强液相色谱-质谱/质谱联用仪: 尤其适用于热不稳定、难挥发的大极性衍生物的高灵敏度、高选择性定量分析。

<强高效液相色谱仪: 配备紫外、荧光或二极管阵列检测器,用于分析经相应标记的衍生化产物。

<强气相色谱仪: 配备火焰离子化检测器或电子捕获检测器,用于常规挥发性衍生物的分离与定量。

<强自动衍生化工作站: 集成加热、振荡、加液、吹氮浓缩等功能,实现衍生反应过程的程序化与标准化控制。

<强氮吹浓缩仪: 用于衍生反应前后样品的快速浓缩或溶剂置换,是样品前处理的关键设备。

<强离心浓缩仪: 结合真空和离心力,温和地去除挥发性溶剂,避免热不稳定衍生物降解。

<强精密移液器与液体处理工作站: 确保衍生化试剂添加的精确性和重复性,对于微量样本尤其重要。

<强恒温振荡金属浴或烘箱: 为需要加热孵育的衍生化学反应提供稳定且均匀的温度环境。

<强超高效液相色谱系统: 与质谱联用,为复杂生物样本中多种衍生化代谢产物的快速、高通量分离提供平台。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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