甲胎蛋白免疫组化仪试验
北检院检测中心 | 完成测试:次 | 2026-07-09
注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。
检测项目
甲胎蛋白定性检测:通过免疫组化染色,在组织切片中定性判断是否存在甲胎蛋白的表达。
甲胎蛋白定位分析:确定AFP在细胞内的具体表达部位,如胞浆、胞膜或胞核。
甲胎蛋白表达强度评估:根据染色深浅,半定量评估AFP的表达水平,通常分为阴性、弱阳性、阳性、强阳性。
阳性细胞百分比计数:在显微镜下计数特定视野中AFP阳性细胞所占的比例。
肝细胞癌诊断与鉴别:作为肝细胞癌的特异性标志物,辅助病理诊断及与其他肝脏肿瘤的鉴别。
生殖细胞肿瘤分型:用于卵黄囊瘤、胚胎性癌等生殖细胞肿瘤的病理分型与诊断。
转移癌原发灶溯源:对于转移性腺癌,AFP阳性提示原发灶可能来源于肝脏或生殖腺。
肿瘤分化程度评估:AFP的表达水平常与肝细胞癌的分化程度相关,有助于评估肿瘤生物学行为。
治疗后疗效监测:对比治疗前后肿瘤组织中AFP表达的变化,间接评估治疗效果。
科研相关机制研究:用于研究AFP在胚胎发育、肿瘤发生发展中的功能与调控机制。
检测范围
肝细胞性肿瘤:主要用于肝细胞癌的诊断,以及肝腺瘤、不典型增生结节等的鉴别。
肝脏转移性肿瘤:鉴别肝脏原发癌与转移性癌。
生殖腺及性腺外生殖细胞肿瘤:包括睾丸、卵巢的卵黄囊瘤、混合性生殖细胞肿瘤等。
前纵隔、腹膜后生殖细胞肿瘤:发生于性腺外部位的生殖细胞肿瘤的辅助诊断。
含有卵黄囊成分的畸胎瘤:用于识别畸胎瘤中恶性成分(如卵黄囊成分)。
部分胃癌与胰腺癌:少数胃肝样腺癌、胰腺癌可异常表达AFP。
胚胎性肝癌:一种罕见的儿童肝脏恶性肿瘤,常呈强阳性表达。
非肿瘤性肝病:在重度肝再生结节、活动性肝炎等情况下,肝细胞可一过性表达AFP。
胎儿及新生儿组织:正常胎儿肝细胞、卵黄囊及消化道组织可生理性表达。
科研动物模型组织:如肝癌小鼠模型、转基因动物模型的肿瘤组织分析。
检测方法
石蜡切片制备:将福尔马林固定、石蜡包埋的组织块切成4-5微米厚的切片并裱于载玻片上。
切片脱蜡与水化:使用二甲苯和梯度乙醇系列处理,去除石蜡并使组织复水,为后续染色做准备。
抗原修复:采用热诱导表位修复法或酶消化法,以暴露因固定而被遮蔽的抗原表位。
内源性过氧化物酶阻断:使用过氧化氢溶液孵育,消除组织内源性过氧化物酶的活性,降低背景染色。
非特异性位点封闭:使用正常动物血清或蛋白封闭液孵育,减少抗体的非特异性吸附。
一抗孵育:滴加鼠或兔抗人AFP单克隆/多克隆抗体,在适宜温度下孵育使抗体与抗原特异性结合。
二抗孵育:滴加与一抗种属对应的辣根过氧化物酶标记的二抗,形成抗原-一抗-二抗复合物。
显色反应:使用二氨基联苯胺等显色底物,在酶催化下产生不溶性的棕色沉淀物定位于抗原处。
苏木素复染:使用苏木素染料对细胞核进行淡染,以提供良好的组织形态学对比背景。
封片与观察:经脱水、透明后,用中性树胶封固切片,置于光学显微镜下观察并判读结果。
检测仪器设备
石蜡切片机:用于将石蜡包埋的组织块切割成数微米厚的连续薄片。
摊片机与烤片机:将切下的组织薄片展开并烘烤,使其牢固贴附于载玻片上。
全自动免疫组化染色仪:核心设备,可编程控制脱蜡、抗原修复、抗体孵育、洗涤、显色等全流程,保证结果的一致性与高效性。
医用微波炉或高压锅