激光捕获切片机单细胞分离试验

检测项目

目标细胞的形态学识别：在显微镜下，根据细胞的大小、形状、核质比等形态特征，初步识别并定位目标细胞。

特定标记物免疫组化染色验证：利用抗体对目标细胞的特异性蛋白标记物进行染色，以化学方法确认细胞身份。

组织病理学区域圈定：根据病理学诊断标准，在数字图像上精确圈定需要研究的特定病变区域或正常组织结构。

单个细胞的精准坐标定位：记录目标细胞在组织切片上的精确X、Y坐标，为激光捕获提供空间定位信息。

激光能量参数优化测试：通过预实验确定能有效熔解转移膜但不损伤细胞DNA/RNA的最佳激光能量和脉冲持续时间。

背景细胞排除确认：确保激光捕获过程仅针对目标细胞，避免周围非目标细胞的污染。

单细胞捕获效率评估：统计成功被转移至收集帽上的目标细胞数量，计算捕获成功率。

细胞完整性后验检查：捕获后，在显微镜下检查收集帽上细胞的完整性，确认无严重碎裂。

样本DNA/RNA质量预判：根据细胞形态和固定情况，初步评估从该细胞中提取核酸的可能质量。

对照细胞的同步分离：在同一实验中，分离正常对照细胞或其它类型的对照细胞，用于后续对比分析。

检测范围

实体肿瘤组织中的稀有癌细胞：从复杂的肿瘤微环境中分离出单个的循环肿瘤细胞或干细胞样癌细胞。

冰冻切片与石蜡包埋组织切片：适用于两种最常见的组织保存和切片方式制备的样本。

神经组织中的特定神经元：从大脑或脊髓切片中分离表达特定标志物的单个神经元细胞。

炎症病灶内的免疫细胞亚群：精确获取炎症区域内的特定类型淋巴细胞或巨噬细胞进行分型研究。

发育生物学中的祖细胞：从胚胎或器官发育的组织中捕获处于特定分化阶段的祖细胞。

转基因动物模型的靶细胞：从模式动物的组织切片中分离出基因修饰的靶细胞进行效果验证。

法医病理学中的微量细胞证据：从混合样本或接触痕迹中分离出极少数具有鉴定价值的个体细胞。

植物组织中的特定细胞类型：应用于植物学研究，分离如根尖分生组织、维管束细胞等特定植物细胞。

考古生物样本中的古细胞：尝试从珍贵的古生物组织切片中获取结构尚存的单个细胞进行古基因组学分析。

空间转录组学的目标区域细胞：作为空间转录组学的前端技术，从定义的解剖学区域批量捕获数十至数百个细胞。

检测方法

苏木精-伊红染色定位法：采用常规H&E染色，在显微镜下根据基本的细胞和组织形态学特征识别目标区域。

免疫荧光/免疫组化标记引导法：使用带有荧光或显色基团的抗体对目标抗原进行标记，实现特异性可视化引导捕获。

活体染料标记追踪法：在活体动物或细胞培养阶段预先引入染料，随后在切片中追踪并捕获带有标记的细胞。

膜接触式转移法：将特制的热塑性转移膜紧贴于组织切片上方，激光激活后膜与目标细胞粘附并将其提起。

非接触式激光弹射法：利用高能脉冲激光从下方照射，将目标细胞直接从切片上弹射到上方的收集管中。

多次迭代捕获法：对于同一区域内的多个分散目标细胞，进行程序化的连续自动捕获，提高通量。

负压辅助收集法：在激光切割或弹射的同时，施加微弱的负压，辅助将已分离的细胞稳定转移至收集容器。

单细胞全基因组扩增前处理法：捕获后立即在收集帽中加入裂解缓冲液，并启动全基因组扩增反应，以获取足量DNA。

单细胞RNA测序文库构建联用法：将捕获的单细胞直接用于构建RNA-seq文库，实现从分离到测序准备的无缝衔接。

激光切割显微解剖法：不仅捕获单个细胞，也可用激光精确切割并收集特定的组织区域或细胞内结构（如核仁）。

检测仪器设备

倒置/正置研究级显微镜：提供高分辨率、高对比度的光学成像平台，用于观察和定位组织切片中的目标细胞。

红外或紫外脉冲激光系统：核心部件，产生高度聚焦的激光束，用于熔解转移膜或直接切割/弹射组织。

机动化高精度载物台：由计算机控制，可在X、Y、Z轴进行纳米级精确定位，实现自动扫描和定位。

数字摄像头及图像采集系统：拍摄并数字化存储整个组织切片的图像，用于在电脑屏幕上进行标注和路径规划。

专用热塑性转移膜及载帽：一次性耗材，激光作用后其局部与细胞结合，将细胞粘附并转移至收集微管盖中。

计算机及控制软件：集成图像分析、坐标定位、激光参数控制和自动化流程操作的核心软件系统。

样品收集模块（微型离心管/PCR管）

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。