毛细管电泳仪核酸功能分析

检测项目

DNA片段大小分析：精确测定DNA片段的长度，是Sanger测序、微卫星分析和片段分析的基础。

DNA浓度定量：通过荧光强度或紫外吸收，对样品中的DNA进行精确定量，评估样品产量。

RNA完整性评估：通过分析核糖体RNA（如28S/18S）的峰图，判断总RNA或mRNA的降解程度。

PCR产物验证：确认PCR扩增是否成功，检查是否存在非特异性条带、引物二聚体或污染。

微卫星不稳定性分析：用于癌症研究、法医鉴定和遗传图谱构建，检测短串联重复序列的长度多态性。

单核苷酸多态性分型：基于片段长度或序列差异，对SNP进行高通量分型，应用于遗传关联研究。

基因表达分析：通过定量PCR产物或差异显示技术产物的大小和量，间接分析基因表达水平。

质粒拓扑结构鉴定：区分超螺旋、线性和开环三种不同构象的质粒DNA。

寡核苷酸纯度检测：评估合成寡核苷酸（引物、探针）的纯度，检测是否含有截短序列。

下一代测序文库质检：在测序上机前，对文库的片段大小分布和浓度进行关键性质控。

检测范围

小片段核酸：可分析低至10个碱基对的短寡核苷酸、引物二聚体及小RNA。

常规PCR产物：适用于50 bp 至 1500 bp范围内的常规PCR扩增片段分析。

长片段PCR产物：高性能系统可分析长达数万碱基对的大片段PCR产物或基因组DNA限制性片段。

质粒与病毒基因组：可用于分析几千至几十万碱基对的质粒DNA、病毒DNA或BAC克隆。

总RNA与mRNA：评估从几十个核苷酸的小RNA到数千碱基的mRNA的完整性与大小。

细胞游离DNA：对血液中片段化的循环游离DNA（通常为160-180bp）进行大小和浓度分析。

甲基化敏感扩增产物：分析经过甲基化特异性PCR或酶切处理后的DNA片段，用于表观遗传研究。

基因编辑产物：检测CRISPR/Cas9等基因编辑技术产生的插入/缺失突变导致的片段长度变化。

微生物群落指纹图谱：如末端限制性片段长度多态性分析，用于微生物多样性研究。

法医DNA样本：涵盖法医学中常见的STR位点扩增产物以及低拷贝数DNA样本的分析。

检测方法

毛细管凝胶电泳: 使用线性聚合物（如聚丙烯酰胺、琼脂糖衍生物）填充毛细管作为分子筛，基于大小分离核酸。

毛细管区带电泳: 在自由溶液中进行，基于核酸的荷质比进行分离，常用于小片段寡核苷酸和蛋白质分析。

激光诱导荧光检测: 最灵敏的检测方式之一，核酸样品需预先用荧光染料标记，通过激光激发产生信号。

紫外吸收检测: 直接利用核酸在260nm处的紫外吸收进行检测和定量，无需标记，但灵敏度较低。

多重荧光检测: 使用不同发射波长的荧光染料标记多组PCR产物，在一次运行中同时分析多个目标片段。

内标与分子量标准品法: 在样品中加入已知长度的内标片段，通过比对迁移时间精确计算未知片段大小。

相对迁移时间法: 通过与已知标准品的迁移时间进行比较，对未知样品进行定性或半定量分析。

绝对定量法: 通过已知浓度的定量标准品建立标准曲线，对待测样品的核酸浓度进行绝对定量。

高压进样与分离: 施加高电压实现纳升级样品的自动进样和高速电泳分离，提升通量和分辨率。

温度梯度控制: 在电泳过程中精确控制毛细管温度，以优化分离效率、提高重现性并减少二级结构影响。

检测仪器设备

毛细管阵列: 仪器核心部件，由数十至数百根并联的熔融石英毛细管组成，实现高通量并行分析。

高压电源模块: 提供高达30kV的稳定直流电压，驱动样品在毛细管中迁移和分离。

激光诱导荧光检测器: 通常包含氩离子激光器等激发光源、光学系统和光电倍增管等组件，用于高灵敏度检测。

紫外/可见光检测器: 配备氘灯或钨灯光源和单色器，用于无标记核酸的直接吸收检测。

自动进样器: 集成多孔板载台和机械臂，实现96孔板或384孔板样本的全自动、顺序进样。

温控系统: 包括帕尔贴元件或循环水浴，用于精确控制毛细管阵列和样品板的温度（通常4°C-70°C）。

聚合物填充系统: 用于在每次或每几次运行后，自动更换毛细管内的筛分介质聚合物溶液。

数据采集与分析软件: 控制仪器运行参数，实时采集电泳图谱，并进行片段大小判定、定量和生成报告。

缓冲液管理系统: 存储和自动更换电极槽中的运行缓冲液，确保电泳环境的稳定性和重现性。

尺寸标准与试剂盒: 配套的标准化试剂，包括不同范围的内标、上样染料、筛分胶和专用缓冲液等消耗品。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。