北检院检测中心 | 点击量:92次 | 01-13
二硫键检测方法
蛋白质二硫键(S-S)是由多肽链上两个半胱氨酸残基的硫原子氧化形成的共价键,广泛分布在生物体内多种蛋白质之中,例如,免疫蛋白,蛋白酶,激素等、细胞表面的受体。不同肽链或者同一条肽链间均可形成二硫键,有助于蛋白质或者多肽折形成特殊的空间结构,这对于它发挥独特的生物功能是非常有意义的。
二硫键的测试方法
检测蛋白质中二硫键大致有以下几种设想:样品蛋白先被水解成肽段混合物,在此过程中,应尽量避免二硫键的重排和交换,再将肽段混合物分离,识别,然后切断肽链上的二硫键,将其与完整氨基酸序列比较,并据此推测肽段上二硫键的定位。目前,二硫键检测普遍采用非片段法X射线晶体衍射法、多维核磁共振波谱等方法和片段法对角线电泳,Edman降解、氨基酸序列分析法以及以质谱为基础的检测方法。质谱技术具有检测范围宽,分辨率和准确度高以及分析速度快等特点,在蛋白二硫键分析检测中得到了广泛应用。
北检院提供基于质谱的蛋白质质谱鉴定服务,包括蛋白二硫键分析、蛋白质串联质谱鉴定、蛋白质组学定性分析、基于质谱的的序列分析、蛋白与蛋白互作分析等。
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