表面等离子共振亲和力检测

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2025-12-18  

表面等离子共振亲和力检测是一种用于实时分析生物分子间相互作用的技术。该方法基于光学原理,能够无标记地监测结合过程,提供动力学和亲和力数据。检测过程涉及传感器芯片表面分子固定、样品注入及信号采集。关键参数包括结合速率常数、解离速率常数和平衡解离常数。该技术适用于蛋白质、核酸、小分子化合物等多种生物样品的分析,要求严格控制温度、缓冲液组成和流速等实验条件。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

分子结合动力学常数测定:通过实时监测结合与解离过程,计算结合速率常数和解离速率常数,用于表征分子相互作用的动态特性。

平衡解离常数测定:在反应达到平衡时测量信号响应值,计算出平衡解离常数,用以评估分子间相互作用的强弱。

特异性结合分析:验证目标分子与固定化配体之间的特异性相互作用,排除非特异性吸附带来的干扰信号。

浓度定量分析:利用已知浓度的标准品建立标准曲线,对待测样品中目标分子的浓度进行精确定量。

表位作图分析:通过竞争结合实验确定抗体所识别的抗原表位区域,用于表征抗体的结合特性。

热力学参数分析:在不同温度下进行结合实验,计算焓变、熵变等热力学参数,深入理解相互作用的驱动力。

活性浓度测定:测量样品中具有生物活性的分子浓度,而非总浓度,更真实地反映样品的功能性。

多价相互作用分析:研究具有多个结合位点的分子间的复杂结合行为,如抗体与多价抗原的相互作用。

抑制剂效能评估:分析小分子抑制剂与靶点蛋白的结合能力,计算半数抑制浓度等参数。

复合物稳定性研究:监测形成的生物分子复合物在不同条件下的稳定性,评估其解离趋势。

检测范围

抗体-抗原相互作用:检测单克隆抗体、多克隆抗体与相应抗原之间的亲和力与动力学参数,用于免疫学研究和诊断试剂开发。

蛋白质-蛋白质相互作用:分析信号通路中蛋白质复合物的形成与解离,揭示细胞生命活动的分子机制。

蛋白质-核酸相互作用:研究转录因子与DNA、RNA结合蛋白与RNA的结合特性,用于基因表达调控研究。

受体-配体相互作用:表征细胞表面受体与其天然配体或药物分子的结合过程,为药物筛选提供依据。

酶-底物/抑制剂相互作用:量化酶与底物类似物或抑制剂的结合常数,用于酶动力学研究和药物设计。

小分子化合物-靶点蛋白相互作用:检测药物候选分子与疾病相关靶点蛋白的亲和力,是早期药物发现的关键环节。

核酸-核酸相互作用:分析DNA-DNA、RNA-RNA杂交的动力学和稳定性,应用于分子诊断探针设计。

脂质膜相关蛋白相互作用:在模拟细胞膜环境下研究膜蛋白与其它分子的相互作用,更接近生理状态。

病毒-宿主细胞表面蛋白相互作用:研究病毒表面蛋白与宿主细胞受体的结合机制,为抗病毒策略提供基础。

细胞表面标记物检测:利用固定化抗体或适配体直接检测完整细胞表面特定抗原的表达水平。

检测标准

ISO15197:2013体外诊断检测系统-糖尿病管理中自测用血糖监测系统的要求。

ISO/IEC17025:2017检测和校准实验室能力的通用要求。

ASTME2533-2017表面等离子共振生物传感器性能表征标准指南。

GB/T33256-2016表面等离子共振生物传感器性能测定方法。

GB/T37861-2019生物芯片基本术语和定义。

YY/T1530-2017表面等离子共振生物传感器。

检测仪器

表面等离子共振仪:核心光学检测设备,通过监测传感器芯片表面折射率变化实时反映分子结合事件,提供动力学和亲和力数据。

微流体控制系统:精确控制样品和缓冲液在微流路中的流速与流向,确保结合反应在稳定可控的流体环境下进行。

生物分子互作分析系统:集成化分析平台,具备自动进样、温度控制和多通道检测功能,支持高通量筛选应用。

传感器芯片预处理装置:用于芯片表面的清洁、活化和配体固定化处理,为后续分子结合实验准备均一的反应界面。

数据采集与分析软件:实时采集原始传感信号,通过内置算法进行基线校正、曲线拟合和动力学参数计算,生成最终报告。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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