肝微粒体体外代谢测试

检测项目

代谢稳定性测定：评估化合物在肝微粒体温孵体系中的降解速率，通过测定母体化合物随时间的剩余量，计算半衰期和固有清除率等关键药代动力学参数。

代谢产物鉴定：利用高分辨率质谱技术对温孵样品进行分析，识别和解析化合物经肝微粒体代谢后生成的I相及II相代谢产物结构。

CYP450酶表型分析：采用选择性化学抑制剂或重组单酶体系，确定负责化合物代谢的主要细胞色素P450同工酶，预测潜在的药物-药物相互作用。

酶动力学参数测定：通过测定不同底物浓度下的代谢速率，计算米氏常数和最大反应速率，定量表征代谢酶对底物的亲和力和催化效率。

时间依赖性抑制评价：考察抑制剂与肝微粒体预孵育后对CYP450酶活性的影响，判断化合物是否存在机制性抑制或自杀性抑制风险。

可逆性抑制评价：将抑制剂与探针底物同时加入温孵体系，评估化合物对CYP450酶活性的直接抑制作用强度，计算半数抑制浓度。

血浆蛋白结合率测定：通过平衡透析或超滤法测定化合物与血浆蛋白的结合比例，为体外代谢数据向体内外推提供校正依据。

种属差异性比较：平行进行人、大鼠、犬、猴等多种属肝微粒体代谢实验，分析代谢途径和速率的种属差异，为临床前研究选择合适动物模型。

反应表型鉴定：综合运用化学抑制、抗体抑制及重组酶实验数据，明确参与化合物代谢的主要酶系及其贡献率。

代谢软点分析：结合质谱碎片信息与化学结构，确定化合物分子中易被代谢修饰的位点，指导先导化合物的结构优化以改善代谢稳定性。

检测范围

小分子化学创新药：在药物发现与开发早期阶段，对候选化合物进行体外代谢特性筛选，评估其成药性和开发潜力。

中药活性成分：研究天然产物提取物中单一成分或组分在肝脏中的代谢命运，阐明其体内药效物质基础及可能的毒性来源。

农药及其残留物：评估农药原药及其环境降解产物在哺乳动物体内的代谢活化或解毒途径，进行毒理学风险评价。

食品添加剂：检测各类防腐剂、着色剂、甜味剂等食品添加剂经肝微粒体代谢后的产物，评估其生物转化过程及安全性。

环境污染物：研究多环芳烃、重金属络合物等环境污染物在肝脏中的生物转化机制，揭示其毒理学效应和代谢归宿。

化妆品原料：对化妆品中使用的化学防晒剂、防腐剂等成分进行皮肤吸收后的肝脏代谢模拟，评估其全身暴露风险。

化工中间体：对工业生产过程中使用的有机溶剂、合成中间体等进行代谢转化研究，为职业暴露风险评估提供依据。

候选药物代谢物：对在体内研究中发现的候选药物主要代谢物进行体外生成与鉴定，确认其结构并评估潜在活性或毒性。

保健品功效成分：研究维生素、植物甾醇等保健品成分的肝脏代谢特征，为其生物利用度和功效机制研究提供数据。

药物杂质与降解产物：考察药物在生产或贮存过程中产生的杂质及降解产物在肝脏中的代谢行为，评估其安全性风险。

检测标准

FDA Guidance for Industry: Drug Interaction Studies — Study Design, Data Analysis, and Clinical Implications.

EMA Guideline on the investigation of drug interactions.

ISO 10993-16:2017 Biological evaluation of medical devices — Part 16: Toxicokinetic study design for degradation products and leachables.

GB/T 16886.16-2013 医疗器械生物学评价 第16部分：降解产物和可沥滤物毒代动力学研究设计。

ICH M3(R2) Guidance on Nonclinical Safety Studies for the Conduct of Human Clinical Trials and Marketing Authorization for Pharmaceuticals.

ICH S7A Safety Pharmacology Studies for Human Pharmaceuticals.

中华人民共和国药典2020年版 通则 9011 药物稳定性试验指导原则。

GB/T 28538-2012 化学品 体外肝微粒体代谢试验方法。

OECD Test No. 417: Toxicokinetics.

ASTM E1850-2004(2019) JianCe Guide for Selection of Resident Species as Test Organisms for Aquatic and Sediment Toxicity Tests.

检测仪器

液相色谱-质谱联用仪：该系统将液相色谱的分离能力与质谱的高灵敏度检测相结合，用于复杂生物样品中待测物及其代谢产物的分离、定性与定量分析。

恒温振荡培养箱：提供精确控制的温度环境和均匀的振荡条件，确保肝微粒体与底物在最佳条件下进行恒温孵育反应。

高速冷冻离心机用于在低温条件下快速分离孵育反应终止后的样品，沉淀蛋白质并获取含有待测物的上清液以供后续分析。

超高效液相色谱仪：采用小粒径色谱柱和高压输液系统，实现代谢样品的高速、高分辨率分离，缩短分析时间并提高检测灵敏度。

氮吹浓缩仪: 通过向样品表面吹扫惰性氮气并辅以加热，温和地蒸发萃取液中的有机溶剂，达到浓缩目标分析物的目的。

酶标仪: 基于吸光度或荧光原理，快速检测肝微粒体中总蛋白浓度或特定探针底物代谢反应的速率，用于体系标准化和活性验证。

精密分析天平: 提供高精度的称量功能，用于准确称量待测化合物、辅酶以及缓冲盐等试剂，保证实验体系的准确性和重现性。

-80℃超低温冰箱: 提供极低的恒定储存温度，用于长期稳定保存肝微粒体分装样品、标准品溶液及其他生物试剂，防止其降解失活。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。