项目数量-9
源内裂解干扰排除实验
北检院检测中心 | 完成测试:次 | 2025-12-22
注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。
检测项目
目标片段特异性验证:通过设计特异性引物和探针,结合扩增曲线与溶解曲线分析,确认扩增产物的单一性和特异性,排除非特异性条带或引物二聚体的干扰。
内源性参照基因检测:在相同反应体系中同时扩增一个稳定的内源性参照基因,用于监控核酸提取效率及反应体系的有效性,确保实验结果的可比性。
无模板对照实验:在扩增反应体系中不加入任何模板核酸,用于检测试剂、耗材或操作环境中是否存在核酸污染,是判断假阳性的关键对照。
无逆转录酶对照实验:在反转录PCR流程中,设置不含逆转录酶的反应对照,用于区分经反转录产生的cDNA扩增信号与基因组DNA污染产生的扩增信号。
阳性对照实验:使用已知含有目标序列的标准品作为模板进行平行实验,验证整个检测流程的有效性以及试剂活性的可靠性。
交叉污染评估:通过空间分隔、使用带滤芯吸头、定期清洁工作台面与仪器设备等措施并设置相应对照,评估并防止样本间的交叉污染。
核酸提取效率评估:通过测量核酸浓度、纯度以及完整性,评估提取方法是否能够有效获得高质量的目标核酸,低效率提取可能导致假阴性结果。
抑制剂残留检测:检测核酸样本中是否残留有蛋白质、酚、肝素等PCR抑制剂,这些物质会显著降低扩增效率,需通过稀释或纯化步骤排除其影响。
琼脂糖凝胶电泳分析:对扩增产物进行电泳分离,通过条带大小、亮度及单一性直观判断扩增是否成功,并初步识别非特异性产物或降解情况。
Sanger测序验证:对特异性扩增产物进行直接测序,将获得的序列与目标序列进行比对,从序列水平最终确认扩增产物的正确性,是最高级别的验证手段。
检测范围
临床病原体核酸检测:用于鉴别诊断感染性疾病病原体,如病毒、细菌、真菌的核酸,排除样本中宿主DNA或环境微生物污染造成的假阳性。
转基因作物成分鉴定:应用于食品及农产品中转基因成分的定性与定量检测,确保检测信号来源于特定的外源基因而非内源相似序列或操作污染。
法医物证DNA分析:在法医科学中用于对微量、降解的生物样本进行个体识别和亲缘鉴定,排除其他个体DNA污染对鉴定结果的干扰至关重要。
肿瘤基因突变检测:用于检测肿瘤组织或液体活检样本中的体细胞突变,需要区分真正的低频突变与扩增或测序过程中引入的错误。
基因表达水平研究:在实时荧光定量PCR实验中,准确测量特定基因的mRNA表达量,需排除基因组DNA污染并确保扩增效率的一致性。
细胞系身份认证:通过短串联重复序列分析等方法对培养细胞系进行鉴定,防止细胞系间交叉污染或误判,保证实验材料的准确性。
环境微生物群落分析:对环境样本中的微生物多样性进行研究时,需排除试剂和实验环境中的背景微生物DNA对群落结构分析结果的影响。
食品安全过敏原检测:检测食品中微量的过敏原成分如花生、麸质等的核酸残留,需要高灵敏度的方法并严格防止交叉污染。
物种鉴定与溯源:应用于野生动物保护、进出口检验检疫等领域,通过DNA条形码技术鉴定物种来源,确保结果不受近缘物种或污染物干扰。
基因编辑效果验证:在CRISPR等基因编辑技术中,验证目标位点是否被成功编辑,并排除脱靶效应或非特异性切割产生的背景信号。
检测标准
GB/T 27403-2008 实验室质量控制规范 分子生物学检测
GB/T 37872-2019 转基因植物产品数字PCR检测方法
GB/T 19495.2-2004 转基因产品检测 实验室技术要求
ISO 20395:2019 Biotechnology — Requirements for evaluating the performance of quantification methods for nucleic acid target sequences — qPCR and dPCR
ISO/IEC 17025:2017 General requirements for the competence of testing and calibration laboratories
ASTM E1873-2006 JianCe Guide for Detection of Nucleic Acid Sequences by the Polymerase Chain Reaction Technique
YY/T 1591-2017 人类EGFR基因突变检测试剂盒
SN/T 5334.1-2020 口岸食品病原体分子分型MLVA方法 第1部分:沙门氏菌
检测仪器
实时荧光定量PCR仪:该仪器能够在PCR扩增过程中实时监测荧光信号的变化,用于对靶核酸进行定性和定量分析,并可通过溶解曲线分析判断产物的特异性。
核酸蛋白测定仪:利用紫外吸光度原理快速测量核酸样本的浓度和纯度,评估核酸提取质量并检测是否存在蛋白质或其他污染物残留。
琼脂糖凝胶电泳系统:通过电场作用使核酸片段在琼脂糖凝胶中按分子量大小分离,经染色后可视化观察,用于初步判断扩增产物的有无、大小及特异性。
生物分析仪:采用微流控芯片技术对核酸样本进行自动化电泳分析,提供高灵敏度的核酸片段分布、浓度和完整性信息,尤其适用于微量样本的质量控制。
Sanger测序仪:基于双脱氧链终止法原理进行DNA序列测定,用于对PCR扩增产物进行序列验证,是确认目标片段序列正确性的金标准方法。
超净工作台:提供局部无菌操作环境,通过垂直或水平层流空气防止空气中的微粒和微生物污染样品,是进行无菌核酸操作的基础设备。
高速冷冻离心机用于快速沉降细胞碎片、浓缩核酸或分离不同组分,其冷冻功能可防止实验过程中核酸降解,是核酸提取纯化的关键设备。
检测流程
线上咨询或者拨打咨询电话;
获取样品信息和检测项目;
支付检测费用并签署委托书;
开展实验,获取相关数据资料;
出具检测报告。
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