基因表达测试

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2025-12-23  

基因表达测试通过分析特定基因的转录水平,评估细胞或组织在特定状态下的功能活动。该检测涉及RNA提取、质量评估、逆转录及定量分析等关键步骤,要求严格的实验环境控制和数据标准化处理,以确保结果的准确性与可重复性,为生命科学研究与临床诊断提供分子层面的依据。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

总RNA提取与纯化:从细胞或组织样本中分离完整的核糖核酸分子,去除蛋白质、基因组DNA等杂质,确保RNA的完整性和高纯度,为后续分析奠定基础。

RNA完整性数值测定:通过微流控芯片技术评估RNA样品的降解程度,数值反映18S和28S核糖体RNA条带的清晰度,是判断样本质量是否适合进行基因表达分析的关键指标。

微量RNA浓度与纯度检测:使用紫外分光光度法精确测量RNA溶液的浓度,并通过吸光度比值评估蛋白质或有机溶剂残留,确保样品符合定量标准。

逆转录聚合酶链反应:以纯化的RNA为模板,在逆转录酶作用下合成互补DNA,将不稳定的RNA信息转化为稳定的DNA分子,便于后续的扩增与检测。

实时荧光定量PCR:通过监测PCR扩增过程中荧光信号的累积,对特定基因的转录本进行绝对或相对定量,具有高灵敏度、高特异性和宽动态范围的特点。

基因表达微阵列分析:将大量基因探针固定于固相支持物上,与标记的样本cDNA杂交,通过扫描荧光信号强度一次性检测成千上万个基因的表达水平。

高通量RNA测序:对样本中的所有转录本进行深度测序,能够发现新的转录本、可变剪切事件以及基因融合,提供全面的转录组信息。

数字PCR绝对定量:将PCR反应体系分割成数万个微滴或孔道,通过终点荧光检测进行计数,实现不依赖于标准曲线的绝对拷贝数定量,精度极高。

原位杂交检测:使用标记的核酸探针与细胞或组织切片中的目标mRNA进行杂交,在形态学背景下定位基因表达的具体位置,用于空间转录组学研究。

Northern印迹分析:通过凝胶电泳分离RNA样品,转移至膜上后用特异性探针杂交,用于检测特定mRNA的大小和表达量,是传统的验证性技术。

核糖核酸酶保护实验:利用特异性探针与目标RNA杂交后,用核糖核酸酶消化未杂交的单链RNA,通过电泳分析被保护的片段,用于定量和定位分析。

检测范围

人类外周血单个核细胞:从人体静脉血中分离的淋巴细胞和单核细胞,常用于免疫相关基因表达谱研究、疾病生物标志物探索及药物疗效评估。

动物模型组织标本:包括小鼠、大鼠等实验动物的器官或组织样本,用于模拟人类疾病机制、药效学评价及基础生命科学问题的研究。

植物叶片与根系组织:采集不同生长条件或胁迫环境下的植物组织,分析其基因表达变化以研究抗逆机制、生长发育调控及代谢途径。

微生物培养物:细菌、酵母等微生物在不同培养条件下的菌体样本,用于研究代谢通路调控、应激反应及外源基因表达效率的优化。

细胞系与原代细胞:包括各种肿瘤细胞系、干细胞及从组织中直接分离培养的原代细胞,用于细胞功能研究、信号通路分析及毒性测试。

福尔马林固定石蜡包埋组织:临床病理存档样本,虽RNA存在一定降解,但经特殊处理后可用于回顾性研究及疾病分子分型的辅助诊断。

新鲜冷冻组织标本:手术切除后迅速置于液氮或超低温冰箱保存的组织,能最大限度地保持RNA完整性,是高质量转录组研究的理想材料。

血清与血浆循环核酸:从血液离心后的上清液中提取的无细胞RNA,作为非侵入性的液体活检样本,用于疾病早期诊断和预后监测。

口腔拭子与唾液样本:通过无创方式采集的口腔上皮细胞或唾液中的RNA,适用于遗传学筛查、流行病学调查及法医学个体识别等领域。

环境微生物群落样本:从土壤、水体等自然环境中收集的微生物群体,通过宏转录组学分析其在自然环境中的活性与功能基因表达情况。

检测标准

ISO 20395:2019:生物技术-核酸定量方法的要求-核酸定量方法性能评估指南。

ISO 20166-1:2018:分子体外诊断检查-福尔马林固定石蜡包埋组织检验过程-第1部分:分离的DNA。

GB/T 37872-2019:核酸提取纯化试剂盒质量评价技术规范。

GB/T 30989-2014:高通量基因测序技术规程。

GB/T 34796-2017:核酸浓度测定方法-紫外分光光度法。

YY/T 1183-2019:核酸提取试剂盒(磁珠法)行业标准。

ASTM E2852-12(2018):微阵列数据交换标准规范。

检测仪器

微量分光光度计:利用紫外光吸收原理测量微量核酸样品的浓度和纯度,其双光束设计可校正缓冲液背景干扰,确保浓度测量准确。

生物分析仪:基于微流控芯片和激光诱导荧光检测技术,自动评估RNA完整性数值和大小分布,提供样品质量的可视化电泳图谱。

实时荧光定量PCR仪:集成温控模块、光学检测系统和数据分析软件,能够实时监测扩增曲线,精确计算循环阈值用于基因表达相对或绝对定量。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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