核酸含量倍性测定

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2025-12-25  

核酸含量倍性测定是分析生物样本中特定核酸序列相对拷贝数的技术。该测定通过定量PCR或数字PCR等方法,精确评估基因剂量变异。检测过程需严格控制引物特异性、扩增效率和样本质量,确保数据准确性和可重复性。该技术应用于遗传病诊断、肿瘤基因组学和转基因生物检测等领域。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

绝对定量分析:通过标准曲线法定量目标核酸的绝对拷贝数,建立浓度与扩增循环阈值的线性关系,适用于病原体载量检测。

相对定量分析:比较目标基因与内参基因的扩增效率,计算相对表达量或拷贝数变异,用于基因表达差异分析。

拷贝数变异检测:识别基因组特定区域拷贝数的增加或缺失,基于荧光信号强度比值判定倍性变化,应用于癌症基因组研究。

等位基因特异性定量:区分并定量样本中不同等位基因的拷贝数,通过探针熔解曲线分析单核苷酸多态性位点。

微生物载量测定:定量环境或临床样本中微生物特异性基因序列的丰度,评估感染程度或微生物群落结构。

转基因成分定量:检测转基因作物中外源基因的拷贝数比例,参照物种特异性内源基因进行标准化计算。

线粒体DNA倍性分析:测定线粒体基因组相对于核基因组的拷贝数比值,反映细胞能量代谢状态或线粒体疾病标志。

病毒整合位点定量:评估病毒DNA整合到宿主基因组的拷贝数,通过特异性引物扩增病毒-宿主连接区域。

甲基化密度关联倍性分析:结合亚硫酸盐处理与定量PCR,分析特定基因座甲基化程度与基因拷贝数的相关性。

单细胞倍性测定:通过全基因组扩增技术对单个细胞进行核酸倍性分析,用于肿瘤异质性研究。

检测范围

人类外周血样本:采集静脉血分离白细胞DNA,用于遗传病相关基因拷贝数变异筛查和产前诊断。

植物组织样本:提取叶片或种子基因组DNA,进行品种纯度鉴定和转基因作物特性评估。

微生物培养物:从细菌或真菌培养物中提取核酸,监测工程菌株质粒拷贝数稳定性。

石蜡包埋组织切片:脱蜡处理后提取福尔马林固定组织的DNA,用于存档样本的回顾性基因倍性研究。

环境DNA样本:过滤水或土壤提取物中的宏基因组DNA,评估特定微生物类群的环境丰度。

细胞系培养物:收集体外培养的哺乳动物细胞,监控长期传代过程中基因组稳定性。

法医生物学样本:从毛发、唾液等微量样本中提取DNA,进行个体识别和亲缘关系分析。

食品安全检测样本:检测加工食品中动物源性成分比例,基于物种特异性基因拷贝数定量。

病原体临床分离株:分离患者样本中的病毒或细菌核酸,评估耐药基因拷贝数变化。

古生物化石样本:从骨骼或牙齿化石中提取古DNA,研究灭绝物种的基因组特征。

检测标准

ISO 20395:2019 生物技术-核酸序列定量方法的要求和性能评价

GB/T 37872-2019 核酸定量测定通用要求

ISO 21571:2013 食品中转基因生物检测核酸提取方法

GB/T 19495.4-2004 转基因产品检测核酸提取纯化方法

ASTM E1873-2006 实时PCR法检测核酸标准指南

ISO 17025:2017 检测和校准实验室能力通用要求

GB/T 30989-2014 高通量测序平台性能验证方法

YY/T 1182-2010 病原微生物核酸扩增检测试剂盒

ISO 22118:2011 食品和饲料中病原微生物PCR检测方法

GB/T 38164-2019 畜禽物种源性成分定量检测方法

检测仪器

实时荧光定量PCR仪:监测PCR扩增过程中荧光信号强度变化,通过阈值循环数计算初始模板浓度,实现核酸分子绝对定量。

数字PCR系统:将反应体系分割为数千个微滴后进行终点PCR,通过阳性微滴比例直接计算靶序列拷贝数,无需标准曲线。

微量分光光度计:测量核酸溶液在260nm波长处的吸光度值,快速评估样本纯度和浓度,确保模板质量符合检测要求。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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