项目数量-99964
糖基化位点质谱解析
北检院检测中心 | 完成测试：次 | 2025-12-29
糖基化位点质谱解析是通过质谱技术精确鉴定蛋白质上糖基化修饰发生位点的分析方法。该方法涉及样品前处理、糖肽富集、质谱检测与数据分析等关键步骤，要求对糖链结构、碎片离子谱图及数据库搜索算法有深入理解，以确保位点鉴定的准确性和可靠性。
注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。
检测项目
样品前处理与酶解：对蛋白质样品进行还原烷基化等预处理，并使用特异性蛋白酶将其酶解成肽段混合物，为后续糖肽富集和质谱分析奠定基础。
糖肽的富集与纯化：利用亲水相互作用色谱、凝集素亲和色谱或亲和作用材料从复杂肽段混合物中选择性分离和浓缩糖肽，降低非糖基化肽段的干扰。
液相色谱-质谱联用分析：通过高效液相色谱将富集后的糖肽分离，并在线导入高分辨率质谱仪进行检测，获得糖肽的精确分子量和碎片信息。
母离子扫描与碎裂图谱采集：在质谱中设置特定触发条件，对疑似糖肽的母离子进行选择，并采用碰撞诱导解离或电子转移解离等技术产生碎片离子图谱。
糖基化位点的初步鉴定：通过分析质谱图谱中的特征离子（如氧鎓离子）和肽段骨架断裂模式，初步推断可能的糖基化修饰位点。
糖链组成的解析：对附着于肽段上的寡糖链进行结构解析，确定其单糖组成、连接顺序以及可能存在分支情况。
定量比较分析：使用非标记或同位素标记定量技术，比较不同样品中特定糖基化位点的修饰水平变化。
数据库搜索与结果验证：将获得的质谱数据与蛋白质序列数据库进行比对，利用专用算法鉴定确切的修饰位点，并通过人工核查碎片离子匹配度进行验证。
修饰特异性评估：评估鉴定到的糖基化位点附近氨基酸序列的特征，确认其是否符合已知的糖基化共识序列（如N-连接糖基化的Asn-X-Ser/Thr模体）。
方法学验证与质量控制：对整个分析流程的重现性、灵敏度和准确性进行评估，确保检测结果可靠可信。
检测范围
治疗性单克隆抗体：用于分析抗体Fc区和Fab段的N-连接糖基化修饰，其糖型直接影响抗体的效应功能药代动力学性质。
重组治疗性蛋白质：适用于各类通过基因工程技术表达的重组蛋白药物其糖基化修饰的质量控制和特性鉴定。
检测流程
线上咨询或者拨打咨询电话;
获取样品信息和检测项目;
支付检测费用并签署委托书;
开展实验，获取相关数据资料;
出具检测报告。
上一篇：磷酸基团解离分析
下一篇：蜘蛛丝pH敏感性实验
