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硫氧还蛋白病理切片组化分析
北检院检测中心 | 完成测试:次 | 2025-12-30
注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。
检测项目
组织切片制备:对石蜡包埋或冷冻的组织样本进行连续薄层切片,确保切片厚度均匀且完整无破损,为后续免疫组化染色提供合格的载体。
脱蜡与水化:采用二甲苯和梯度乙醇系列处理石蜡切片,彻底去除组织中的石蜡成分并使组织复水,恢复其生物活性以利于抗原抗体结合。
抗原修复:通过热诱导或酶消化方法打破甲醛固定引起的蛋白交联,暴露被遮蔽的硫氧还蛋白抗原表位,显著提高抗体结合的敏感性与特异性。
内源性过氧化物酶阻断:使用过氧化氢溶液孵育切片,消除组织细胞内源性的过氧化物酶活性,防止其在后续显色步骤中产生非特异性背景着色。
非特异性位点封闭:采用血清或牛血清白蛋白溶液对切片进行孵育,封闭组织中可能与抗体发生非特异性结合的位点,降低背景染色干扰。
一抗孵育:将特异性抗硫氧还蛋白一抗滴加于组织切片上,在适宜温度下孵育足够时间,使抗体与目标抗原进行高亲和力与特异性的结合。
二抗孵育:应用标记有辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶的二抗与一抗进行结合,通过级联放大信号为后续的显色反应奠定基础。
显色反应:加入二氨基联苯胺或其它显色底物溶液,在酶催化下生成不溶性的有色沉淀物,从而将硫氧还蛋白的分布位置可视化。
苏木素复染:使用苏木素染料对细胞核进行对比染色,JianCe显示组织细胞的形态结构,便于准确定位硫氧还蛋白表达的细胞类型与区域。
封片与镜检:使用中性树胶对染色后的切片进行封固保护,然后在光学显微镜下观察硫氧还蛋白的着色强度、阳性细胞百分比及亚细胞定位情况。
结果半定量分析:采用图像分析系统对切片的染色结果进行数字化采集与分析,计算平均光密度值与阳性区域面积百分比等半定量指标。
检测流程
线上咨询或者拨打咨询电话;
获取样品信息和检测项目;
支付检测费用并签署委托书;
开展实验,获取相关数据资料;
出具检测报告。
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