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核酸提取纯度测定
北检院检测中心 | 完成测试：次 | 2025-12-31
核酸提取纯度测定是分子生物学实验的关键质控环节，用于评估所提取核酸样品中目标核酸与杂质（如蛋白质、盐离子、有机溶剂等）的比率。该测定直接影响下游实验的可靠性与重复性，需通过特定仪器和方法对吸光度比值、荧光强度等参数进行精确分析。
注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。
检测项目
260nm/280nm吸光度比值测定：该比值用于评估核酸样品中蛋白质污染程度，纯DNA和RNA的理想比值分别约为1.8和2.0，偏离此范围表明存在污染物干扰。
260nm/230nm吸光度比值测定：该比值反映核酸样品中盐类、碳水化合物或酚类等小分子杂质的残留情况，通常要求比值高于2.0以确保样品纯净。
核酸浓度定量分析：基于核酸在260nm处的紫外吸光特性，通过比尔-朗伯定律计算样品中DNA或RNA的实际浓度，为后续实验提供准确的用量依据。
荧光染料法纯度评估：利用与核酸特异性结合的荧光染料（如PicoGreen、RiboGreen），通过检测荧光信号强度来定量核酸含量，此法对抗干扰能力更强。
琼脂糖凝胶电泳分析：通过电泳分离核酸片段，观察条带清晰度、拖尾现象及有无降解产物，直观判断核酸的完整性与是否存在降解。
毛细管电泳纯度检测：采用毛细管电泳系统分离核酸片段，可精确分析片段大小分布并评估样品中杂质的存在情况，分辨率高于常规琼脂糖凝胶电泳。
蛋白质残留量检测：使用专一性蛋白质测定方法（如BCA法、Bradford法）定量分析核酸样品中共沉淀的蛋白质杂质含量。
RNase或DNase活性检测：评估核酸提取过程中是否存在核糖核酸酶或脱氧核糖核酸酶的污染，这些酶会降解目标核酸影响下游应用。
内毒素含量测定：对于临床或细胞治疗用核酸样品，需检测内毒素水平以确保其符合生物安全性要求，常用鲎试剂法进行定量。
pH值与离子强度测定：检测核酸溶解缓冲液的pH值和导电性，确保其在适宜范围内避免因酸碱度或盐浓度不当导致核酸降解或沉淀。
检测范围
基因组DNA提取物：从动植物组织、血液、细胞培养物等样本中提取的高分子量DNA，其纯度直接影响PCR、Southern印迹等分析的准确性。
质粒DNA制品：细菌培养扩增后提取的环状DNA分子，纯度测定确保其适用于转化、转染及体外转录等分子克隆实验。
总RNA样品：包含mRNA、rRNA、tRNA等多种RNA组分的提取物，纯度要求高以避免RNase污染及蛋白质干扰逆转录反应。
小分子RNA（如miRNA、siRNA）：长度较短的非编码RNA分子，提取后需特别关注小片段杂质及试剂残留对功能研究的影响。
检测流程
线上咨询或者拨打咨询电话;
获取样品信息和检测项目;
支付检测费用并签署委托书;
开展实验，获取相关数据资料;
出具检测报告。
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