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转录组差异分析
北检院检测中心 | 完成测试:次 | 2026-01-04
注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。
检测项目
总RNA提取与质量评估:采用专用试剂盒从细胞或组织中分离完整的总RNA,并通过微流控芯片分析仪评估RNA的完整性指数和纯度,确保样本质量符合后续建库要求。
mRNA富集与文库构建:利用寡核苷酸探针或核糖体RNA去除法选择性富集信使RNA片段,随后进行片段化、逆转录、末端修复及接头连接,构建可用于高通量测序的cDNA文库。
高通量测序
原始测序数据质量控制:对下机的原始测序数据进行质量评估,包括碱基质量分布、GC含量、接头污染及重复序列比例分析,筛选合格数据用于后续比对。
序列比对与基因定量:将高质量测序读段与参考基因组或转录组进行比对,统计每个基因或转录本的读段计数,计算其表达丰度如FPKM或TPM值。
差异表达基因分析:基于基因表达定量矩阵,运用统计模型如DESeq2或edgeR进行组间差异分析,筛选满足设定显著性阈值和变化倍数的差异表达基因列表。
聚类分析与可视化:对差异表达基因的表达模式进行层次聚类或主成分分析,并通过热图、火山图、散点图等图形化方式展示样本间关系及基因表达趋势。
基因本体论功能富集分析:将筛选出的差异表达基因映射到基因本体论数据库,进行生物学过程、细胞组分和分子功能层面的显著性富集分析,揭示其潜在生物学功能。
KEGG通路富集分析:基于京都基因与基因组百科全书数据库,分析差异表达基因显著富集的代谢通路或信号转导通路,阐释其在特定生理病理条件下的调控网络。
蛋白质-蛋白质互作网络构建:整合STRING等数据库信息,构建差异表达基因编码蛋白的相互作用网络,识别网络中的核心节点蛋白及其功能模块。
检测范围
疾病生物标志物筛选: 通过比较疾病组与对照组的转录组数据,识别与疾病发生发展相关的特异性高表达或低表达基因,为疾病诊断和治疗靶点开发提供候选分子.
药物作用机制研究: 分析药物处理前后细胞或动物模型转录谱变化,揭示药物对信号通路和细胞功能的调控作用,阐明其药效学及潜在副作用机制.
检测流程
线上咨询或者拨打咨询电话;
获取样品信息和检测项目;
支付检测费用并签署委托书;
开展实验,获取相关数据资料;
出具检测报告。
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