质粒接合转移测试

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2026-01-04  

质粒接合转移测试是评估细菌间遗传物质转移能力的关键实验。该检测通过模拟自然条件下的接合过程,分析质粒在不同菌株间的传递效率与稳定性。检测过程涉及供体菌与受体菌的筛选、接合条件优化、转接合子鉴定及质粒稳定性验证等核心环节,其结果对研究细菌耐药性传播、基因工程载体构建及环境微生物安全具有重要意义。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

供体菌株鉴定与活性确认:对提供质粒的细菌进行物种鉴定和生理生化特性分析,确保其携带目标质粒且具备正常的接合转移能力。

受体菌株筛选与标记:选择不含目标质粒且具有特定选择性标记的菌株作为受体,通过抗生素抗性筛选或营养缺陷型互补等方法进行验证。

接合条件优化实验:系统研究不同温度、pH值、培养基成分及接触时间对接合转移频率的影响,确定最佳接合反应参数。

接合混合物制备与共培养:将供体菌与受体菌按特定比例混合,在适宜培养基上进行液体或固体表面共培养,促进菌体接触和质粒转移。

转接合子筛选与计数:使用双重或多重抗生素选择平板筛选成功接收质粒的转接合子,通过菌落计数计算接合转移频率。

质粒提取与电泳验证:从转接合子中提取质粒DNA,利用琼脂糖凝胶电泳分析质粒大小和构型,确认质粒的完整性和正确性。

抗性基因PCR确认:采用特异性引物对转接合子进行聚合酶链式反应扩增,检测目标抗性基因的存在,验证质粒携带的功能基因。

质粒稳定性连续传代测试:将转接合子在非选择性培养基中连续传代培养,定期检测质粒保留率,评估质粒在宿主菌中的遗传稳定性。

接合抑制试验:在接合体系中添加已知抑制剂或改变特定环境因素,观察对接合转移效率的影响,研究接合作用的可抑制性。

检测范围

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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