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引物二聚体评估
北检院检测中心 | 完成测试：次 | 2026-01-05
引物二聚体评估是分子生物学实验中的关键质控环节，直接影响PCR等扩增技术的特异性和灵敏度。该检测通过分析非特异性产物，评估引物设计的合理性及反应体系的优化程度。专业检测聚焦于二聚体的形成机制、表征方法及其对定量结果的干扰，为实验数据的可靠性提供依据。
注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。
检测项目
凝胶电泳分析：通过琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶分离PCR产物，依据条带大小和亮度直观判断引物二聚体的存在与否及其相对含量。
熔解曲线分析：在实时荧光定量PCR结束后进行程序性升温，通过监测荧光信号变化获取熔解曲线，利用二聚体与目的产物熔解温度的差异进行区分。
毛细管电泳分析：采用高通量毛细管电泳系统对扩增产物进行高分辨率分离，精确计算引物二聚体的片段大小和峰面积比例。
高效液相色谱分析：利用HPLC技术根据核酸分子的大小和极性进行分离，定量检测反应体系中引物二聚体的生成量。
紫外光谱分析：通过对纯化后的PCR产物进行紫外吸光度扫描，根据260nm处的吸光值及260/280比值间接评估样品纯度及二聚体污染情况。
荧光染料结合检测：使用特异性结合双链DNA的荧光染料，通过比较不同温度下的荧光强度变化，特异性识别并量化双链结构的引物二聚体。
等温滴定量热法：监测引物之间结合过程中热量的吸收或释放，从热力学角度研究引物二聚体的形成能力和结合稳定性。
表面等离子共振技术：将生物素标记的引物固定于传感器芯片表面，实时监测溶液中另一条引物与之结合的动力学过程，评估二聚体形成速率。
核磁共振波谱分析：用于解析引物二聚体在溶液中的三维空间结构，揭示其碱基配对方式及稳定性相关的分子间作用力。
计算模拟预测：运用生物信息学软件对引物序列进行自由能计算和二级结构预测，在实验前评估形成稳定二聚体的潜在风险。
检测范围
TaqMan探针法qPCR试剂盒：评估探针与引物之间或引物自身可能形成的二聚体对荧光信号采集造成的背景干扰和淬灭效应。
Sanger测序反应预混液：检测用于测序的PCR扩增步骤中产生的引物二聚体，确保测序模板的纯度和测序结果的准确性。
数字PCR反应体系：在微滴或微孔中进行绝对定量时，需严格监控引物二聚体以避免其对阳性信号判读和拷贝数计算产生偏差。
检测流程
线上咨询或者拨打咨询电话;
获取样品信息和检测项目;
支付检测费用并签署委托书;
开展实验，获取相关数据资料;
出具检测报告。
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