代谢通路中间体分析

检测项目

糖酵解途径中间体：包括葡萄糖-6-磷酸、果糖-6-磷酸、果糖-1,6-二磷酸、磷酸烯醇式丙酮酸等，反映细胞糖分解供能状态。

三羧酸循环中间体：如柠檬酸、异柠檬酸、α-酮戊二酸、琥珀酸、苹果酸等，是能量代谢和碳骨架供应的核心指标。

磷酸戊糖途径中间体：如6-磷酸葡萄糖酸、核酮糖-5-磷酸等，用于评估核苷酸合成和抗氧化还原力生成能力。

氨基酸代谢中间体：包括各类氨基酸及其衍生物，如谷氨酸、天冬氨酸、丙氨酸等，关联蛋白质代谢与氮平衡。

核苷酸代谢中间体：如次黄嘌呤核苷酸、腺嘌呤核苷酸、尿嘧啶核苷酸等，指示细胞增殖与核酸合成活性。

脂质代谢中间体：如乙酰辅酶A、丙二酰辅酶A、甘油-3-磷酸等，反映脂肪酸合成与分解的动态。

能量电荷相关分子：ATP、ADP、AMP的定量及其比例，直接表征细胞的能量状态。

氧化还原辅因子：NAD+/NADH、NADP+/NADPH的比值，反映细胞的氧化还原平衡与应激水平。

次级代谢产物前体：特定生物合成途径中的关键前体物质，用于研究药物或天然产物的生物合成。

信号分子与激素前体：如某些甾体激素前体或植物激素前体，连接代谢与信号转导过程。

检测范围

动植物组织样本：从肝脏、肌肉、叶片、根等组织中提取代谢物，研究器官特异性代谢。

微生物细胞培养物：分析细菌、酵母等在发酵或不同生长条件下的胞内代谢物谱。

哺乳动物细胞系：用于癌症代谢、药物作用机制等研究，分析细胞模型中的代谢重编程。

血液与血清样本：检测循环系统中的代谢物，用于疾病生物标志物发现或生理状态评估。

尿液样本：非侵入性获取代谢终点产物信息，广泛用于临床诊断和代谢组学研究。

脑脊液与其他体液：用于神经系统疾病研究，分析特定腔室内的代谢物变化。

植物提取物：研究植物在不同发育阶段或胁迫下的初级与次级代谢通路变化。

发酵液上清：监测微生物发酵过程中胞外分泌的代谢产物，优化生产工艺。

亚细胞组分：如线粒体、叶绿体等细胞器分离后，分析其特有的代谢中间体库。

模式生物整体：如果蝇、斑马鱼、小鼠等，进行整体水平的代谢表型分析。

检测方法

液相色谱-质谱联用：最主流的方法，高分离度与高灵敏度结合，适用于绝大多数极性中间体的定性与定量。

气相色谱-质谱联用：适用于挥发性或经衍生化后具挥发性的小分子代谢物，如有机酸、糖类等。

毛细管电泳-质谱联用：对离子型化合物和极性强化合物分离效率极高，样品需求量少。

核磁共振波谱法：非破坏性、无需衍生化，可进行绝对定量和结构解析，但灵敏度相对较低。

酶循环法：利用特异性酶反应偶联NAD(P)H变化，通过吸光度或荧光进行高特异性定量。

荧光标记与检测：使用特定荧光探针或衍生化试剂标记代谢物，实现高灵敏度检测。

放射性同位素示踪：使用13C、15N等标记底物，追踪原子在代谢网络中的流向与分布。

电化学检测法：通常与液相色谱联用，对儿茶酚胺类等具有电化学活性的物质检测灵敏。

离子色谱法：专门用于分离和检测阴离子、阳离子及有机酸等带电代谢物。

薄层色谱法：作为一种快速、经济的初筛方法，可用于部分代谢产物的半定量分析。

检测仪器设备

高分辨液相色谱-质谱联用仪：如Q-TOF、Orbitrap系列，提供精确分子量用于化合物鉴定，是发现性研究的关键设备。

三重四极杆质谱仪：通常与LC或GC联用，通过多反应监测模式实现目标代谢物的高灵敏度、高特异性定量。

气相色谱-质谱联用仪：配备电子轰击离子源，拥有强大的标准谱库，适用于代谢物筛查。

核磁共振波谱仪：通常为400 MHz及以上频率，用于复杂生物样本的全局性代谢指纹图谱分析。

超高效液相色谱仪：提供更高的分离速度、分辨率和灵敏度，是LC-MS系统的核心分离组件。

毛细管电泳仪：高效分离离子和极性分子，常与高灵敏度检测器或质谱联用。

酶标仪：用于基于紫外-可见光或荧光读数的酶学分析法，实现中通量的代谢物浓度检测。

自动衍生化工作站：对样本进行自动化的衍生化处理，提高GC-MS或HPLC分析的重现性和通量。

低温样品制备设备：包括预冷研磨仪、低温离心机等，确保在样品前处理过程中代谢物稳定不降解。

实验室信息管理系统：管理海量的原始数据、谱图及元数据，是进行大规模代谢组学数据分析的基础平台。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。