紫杉烷无菌测试

检测项目

无菌检查：核心检测项目，旨在确认供试品中是否含有需氧菌、厌氧菌及真菌等活的微生物。

培养基适用性检查：验证所用培养基的促菌生长能力，确保其灵敏度符合规定。

方法适用性试验：验证供试品在该检验条件下无抑菌活性或抑菌活性已被有效消除。

需氧菌总数检查：采用硫乙醇酸盐流体培养基，检查需氧菌和兼性厌氧菌的存在。

厌氧菌总数检查：同样使用硫乙醇酸盐流体培养基，但通过培养条件控制，侧重检查专性厌氧菌。

霉菌和酵母菌总数检查：采用沙氏葡萄糖液体培养基，检查样品中霉菌和酵母菌的污染情况。

阴性对照试验：在检验过程中引入不含供试品的稀释液，用于监控整个操作过程的无菌性。

阳性对照试验：在培养基中加入已知的阳性对照菌，以证实培养基的促菌生长能力。

过滤法冲洗量验证：确定消除供试品抑菌作用所需的最小冲洗液体积，是方法适用性的关键部分。

环境监控：对无菌测试操作环境（如超净工作台、隔离器）进行沉降菌和浮游菌监测，确保操作环境达标。

检测范围

紫杉醇原料药：用于制剂生产的原料药粉末或结晶，需在分装后取样进行无菌检查。

多西他赛原料药：另一种半合成紫杉烷类原料药，同样需进行严格的无菌控制。

注射用紫杉醇（白蛋白结合型）：冻干粉针剂，需对成品进行100%无菌检查或基于验证的参数放行。

紫杉醇注射液：含有助溶剂的液体注射液，通常采用薄膜过滤法进行无菌测试。

多西他赛注射液：预充式或西林瓶装的注射液，需检查其最终灭菌工艺或无菌生产工艺的有效性。

脂质体紫杉醇制剂：新型递送系统制剂，其特殊成分可能影响测试方法，需进行专门的方法验证。

聚合物胶束紫杉醇制剂：另一种纳米制剂，其无菌测试需考虑载体材料的潜在干扰。

生产用内包材：如与药品直接接触的注射剂瓶、胶塞等，需进行无菌或微生物限度检查。

配制后的输液袋：临床使用前，将紫杉烷制剂配制于输液袋中的最终产品，在某些监管要求下需进行测试。

工艺验证样品：在无菌生产工艺（如无菌过滤、无菌灌装）验证过程中模拟生产的样品。

检测方法

薄膜过滤法：首选方法，将供试品通过孔径不大于0.45μm的微孔滤膜，冲洗后接种至培养基中培养。

直接接种法：将规定量的供试品直接分别接种至各管培养基中，适用于无法过滤的油性制剂等。

硫乙醇酸盐流体培养基培养法：用于需氧菌和厌氧菌检查，培养温度30-35℃，培养不少于14天。

沙氏葡萄糖液体培养基培养法：用于霉菌和酵母菌检查，培养温度20-25℃，培养不少于14天。

中和法：在培养基或冲洗液中添加中和剂（如聚山梨酯80），以消除样品中防腐剂或抗生素的抑菌作用。

稀释法：通过增加稀释倍数来降低供试品的抑菌性，使其达到可进行有效测试的水平。

参数放行法：非基于终产品测试的方法，通过对灭菌工艺全过程进行严格控制和监测来替代无菌检查。

无菌快速检测法

基于生长法的快速方法：如生物发光技术，通过检测微生物代谢产生的ATP来快速指示污染，但需经过充分验证。

基于活细胞检测的快速方法：如流式细胞术，可快速检测和计数样品中的活微生物。

检测仪器设备

A级层流超净工作台或隔离器：提供ISO 5级的局部无菌操作环境，是进行无菌测试的核心设备。

全自动无菌检查薄膜过滤系统：集成泵、滤杯、管路等，可自动完成过滤、冲洗、加培养基等步骤，减少人为误差。

微生物限度检测仪：专门用于薄膜过滤法的多联式过滤装置，可同时处理多个样品。

高压蒸汽灭菌器：用于对所有直接接触样品的器具、培养基、稀释液等进行灭菌处理。

恒温培养箱

生化培养箱（细菌培养）：可精确控制在30-35℃，用于需氧菌和厌氧菌的培养。

霉菌培养箱：可精确控制在20-25℃，用于霉菌和酵母菌的培养。

生物安全柜：在进行阳性对照操作或处理可能含有病原微生物的样品时，用于保护操作人员和环境。

真空泵或蠕动泵：为薄膜过滤过程提供稳定的负压或正压动力源。

微粒分析仪（可选）：用于检测冲洗后滤膜上的颗粒残留，辅助判断冲洗效果。

快速微生物检测系统：如基于ATP生物发光、流式细胞术等原理的仪器，用于快速筛查和放行。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。