肽膜穿透性实验

皮肤渗透模型：用于评估肽类药物经皮给药的可行性，常使用人工皮肤或皮肤细胞模型。

检测方法

Caco-2细胞转运实验法：将肽加入Caco-2细胞单层的顶端或基底侧，定时取样测定对侧浓度，是金标准方法。

平行人工膜渗透分析法：将肽溶液加入覆盖有人工脂膜的微孔板供体侧，测定受体侧的浓度，用于高通量筛选。

反向透析法：在扩散池中，使用透析膜分隔供受体室，通过测定受体室透析液中的肽量来评估渗透性。

USsing chamber法：将离体肠道组织或培养的细胞单层夹在扩散池中，可同时监测跨膜电位和电阻，功能更全面。

细胞摄取与内化实验：通过低温抑制或使用内吞抑制剂，区分肽是通过跨细胞还是旁路途径进入细胞。

外排蛋白抑制实验：在外排转运蛋白特异性抑制剂存在下进行转运实验，确认外排蛋白对肽渗透的影响。

LC-MS/MS定量分析法：使用液相色谱-串联质谱法对样品中的肽及其代谢物进行高灵敏度、高选择性的定量分析。

荧光标记示踪法：对肽进行荧光标记，利用荧光显微镜或酶标仪进行定性或半定量检测，直观便捷。

放射性同位素标记法：使用含放射性同位素（如³H, ¹⁴C）标记的肽进行实验，通过液闪计数定量，灵敏度极高。

表观渗透系数计算法：根据菲克扩散定律，通过累积渗透量、时间、膜面积和初始浓度等数据计算得出Papp值。

检测仪器设备

细胞培养箱：提供恒定的温度、湿度和CO₂环境，用于培养Caco-2、MDCK等用于构建屏障模型的细胞。

跨膜电阻测量仪：用于实时监测细胞单层的完整性和紧密连接程度，确保实验模型的可靠性。

多功能酶标仪：具备吸光度、荧光和化学发光检测功能，可用于快速检测标记肽的浓度或细胞活性。

液相色谱-串联质谱仪：进行复杂生物样品中痕量肽的分离与准确定量分析的核心设备。

液体闪烁计数器：专门用于检测放射性同位素标记的肽在样品中的放射性强度，实现精确定量。

垂直扩散池系统：由供体池、受体池和样品池夹持器组成，是进行USsing chamber实验的标准设备。

Transwell培养板：多孔聚碳酸酯膜嵌入的培养板，是进行细胞模型转运实验最常用的耗材。

PAMPA板：专门设计的96孔板，其滤板孔底预涂或可自行涂布人工脂质膜，用于高通量PAMPA实验。

自动取样器：与HPLC或LC-MS系统联用，可实现转运实验中多个时间点样品的自动、精确采集与进样。

倒置荧光显微镜：用于观察荧光标记肽在细胞内的定位与分布情况，进行定性或半定量分析。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。