氧化修饰分析测试

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2026-03-12  

本检测系统介绍了氧化修饰分析测试的核心内容,涵盖关键检测项目、广泛的应用范围、主流的技术方法以及必需的仪器设备。文章旨在为研究人员提供一份关于蛋白质、脂质、核酸等生物大分子氧化损伤与修饰分析的全面技术指南,助力于氧化应激相关机制研究、疾病诊断标志物发现及药物开发等领域的工作。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

蛋白质羰基含量:检测蛋白质侧链氨基酸被氧化后形成的羰基衍生物,是衡量蛋白质氧化损伤的经典标志物。

3-硝基酪氨酸:检测酪氨酸残基被过氧亚硝酸盐等活性氮物种硝基化修饰的水平,反映活性氮应激状态。

4-羟基壬烯醛-蛋白加合物:检测脂质过氧化终产物4-HNE与蛋白质的共价加合物,连接脂质氧化与蛋白质损伤。

蛋氨酸亚砜/砜:检测蛋氨酸残基被氧化为亚砜或砜的形式,是重要的可逆氧化修饰,参与信号调控。

二硫键形成:检测蛋白质内或蛋白质间因氧化应激导致的半胱氨酸残基形成的二硫键,影响蛋白质结构与功能。

8-羟基脱氧鸟苷:检测DNA分子中鸟嘌呤碱基的氧化损伤产物,是评估DNA氧化损伤和突变风险的关键生物标志物。

脂质过氧化物:如丙二醛、异前列腺素等,直接测定脂质分子发生过氧化反应的产物含量。

谷胱甘肽氧化还原比值:测定还原型谷胱甘肽与氧化型谷胱甘肽的比值,反映细胞整体的抗氧化能力与氧化还原状态。

高级糖基化终末产物:虽然与糖化相关,但在氧化应激下加速形成,是糖氧化应激的综合性标志物。

超氧化物歧化酶活性:测定此关键抗氧化酶的活性,间接评估机体清除超氧阴离子自由基的能力。

检测范围

血清/血浆样本:用于寻找疾病相关的系统性氧化应激生物标志物,适用于临床诊断研究。

组织匀浆液:从动物或人体组织中获得,用于研究特定器官或病灶局部的氧化损伤程度。

细胞裂解液:来源于培养的细胞系或原代细胞,用于细胞水平研究氧化应激机制及药物干预效果。

尿液样本:适用于检测8-OHdG、异前列腺素等稳定终产物,实现无创、动态监测。

脑脊液:特别用于神经系统疾病如阿尔茨海默病、帕金森病中中枢神经系统的氧化损伤研究。

植物提取物:用于评估植物在逆境胁迫下的氧化损伤以及植物源性抗氧化剂的功效。

食品与保健品:检测油脂氧化程度、蛋白质氧化变性以及评估产品的抗氧化性能。

药品与制剂:监控药物在生产、储存过程中的稳定性,评估其氧化降解产物。

环境污染物:研究大气颗粒物、重金属等环境毒物诱导生物体产生的氧化损伤效应。

化妆品原料:评估油脂、活性成分的氧化稳定性,以及产品对皮肤氧化应激的防护作用。

检测方法

酶联免疫吸附法:利用特异性抗体,高灵敏度、高通量地检测特定氧化修饰产物如3-NT、8-OHdG等。

高效液相色谱法:常与电化学或荧光检测器联用,用于分离和定量多种氧化代谢物,如GSH/GSSG、生物胺氧化物。

气相色谱-质谱联用法:特别适用于挥发性或衍生化后的脂质过氧化产物(如MDA、异前列腺素)的精准定性与定量。

液相色谱-串联质谱法:当前最强大的方法,可对复杂样本中的多种氧化修饰蛋白、脂质、核酸进行高特异性、高灵敏度的靶向或非靶向分析。

Western Blotting:使用针对特定氧化修饰(如蛋白羰基、HNE加合物)的特异性抗体,在蛋白质水平进行半定量检测。

分光光度法:基于显色反应,如DNPH法测定蛋白质羰基含量,方法经典、设备要求相对简单。

荧光光谱法:利用某些氧化产物(如脂褐素)或与荧光探针反应后的产物具有荧光的特性进行检测,灵敏度高。

电子顺磁共振波谱法:可直接检测和鉴定短寿命的自由基中间体,是研究自由基产生机制的独特工具。

化学发光法:基于鲁米诺等探针与活性氧反应产生光信号的原理,用于检测总抗氧化能力或特定ROS。

电化学传感法:利用修饰电极对氧化还原活性物质(如尿酸、抗坏血酸)的电化学响应进行快速检测。

检测仪器设备

酶标仪:进行ELISA、分光光度及荧光法检测的核心设备,适用于大批量样本的快速筛查。

高效液相色谱仪:配备紫外、荧光或电化学检测器,用于分离和定量各类氧化修饰小分子化合物。

气相色谱-质谱联用仪:用于挥发性脂质过氧化产物的高分辨率、高灵敏度定性定量分析。

液相色谱-串联质谱仪:特别是高分辨质谱如Q-TOF、Orbitrap,是进行氧化修饰组学研究的顶级平台。

化学发光成像系统:用于捕获Western Blot、凝胶等基于化学发光信号的图像并进行定量分析。

荧光分光光度计:用于精确测量样本的荧光发射光谱,定量荧光标记的氧化产物。

电子顺磁共振波谱仪:专门用于直接检测和表征含有未成对电子的自由基物种。

电化学工作站:用于开发和应用电化学传感器,实时监测氧化还原物质的浓度变化。

紫外-可见分光光度计:用于基于紫外-可见光吸收的常规比色分析,如总抗氧化能力测定。

凝胶成像系统: 用于对经过特殊染色(如DNP肼染色显示蛋白羰基)的凝胶进行拍照和光密度定量分析。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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