免疫组化染色实验

检测项目

细胞增殖标志物Ki-67：用于评估肿瘤细胞的增殖活性，是判断肿瘤良恶性及预后的重要指标。

雌激素受体：主要用于乳腺癌的诊断与分型，指导内分泌治疗方案的选择。

孕激素受体：与雌激素受体联合检测，为乳腺癌的激素治疗提供更全面的依据。

人表皮生长因子受体2：是乳腺癌、胃癌等靶向治疗的关键靶点，其过表达提示可使用曲妥珠单抗等药物治疗。

细胞角蛋白：上皮细胞及其来源肿瘤的特异性标志物，用于鉴别癌与肉瘤、判断肿瘤来源。

波形蛋白：间叶组织来源细胞的特异性标志物，常用于鉴别癌与肉瘤。

S-100蛋白：神经外胚层来源肿瘤的标志物，常用于黑色素瘤、神经鞘瘤等的诊断。

甲状腺转录因子-1：肺腺癌和甲状腺癌的特异性标志物，用于确定肿瘤的原发部位。

前列腺特异性抗原：前列腺上皮细胞的特异性标志物，用于前列腺癌的诊断与鉴别诊断。

CD20：B淋巴细胞的标志物，用于B细胞淋巴瘤的诊断及利妥昔单抗靶向治疗的指导。

检测范围

肿瘤病理诊断与分型：确定肿瘤的组织来源、良恶性、分化程度及具体亚型，是临床应用最广泛的领域。

预后评估：通过检测Ki-67、p53等指标，预测肿瘤的生物学行为和患者的生存结局。

治疗靶点预测：检测HER2、PD-L1、ER/PR等，为靶向治疗、内分泌治疗和免疫治疗提供用药依据。

感染性疾病病原体检测：利用特异性抗体在组织中定位病毒、细菌等病原体，如HPV、EB病毒等。

自身免疫性疾病研究：检测组织中免疫球蛋白、补体的沉积，用于肾小球肾炎、皮肤炎等疾病的诊断。

神经病理学研究：观察脑组织中特定蛋白的异常沉积，如β-淀粉样蛋白、Tau蛋白，辅助阿尔茨海默病等诊断。

心血管疾病研究：检测心肌组织中的特定抗原，用于心肌梗死、心肌炎等的病理研究。

发育生物学研究：追踪特定蛋白在胚胎发育不同阶段的表达与分布，研究细胞分化与组织形成。

药物研发与药效评估：在临床前研究中，评估药物对靶点蛋白表达水平的影响。

法医病理学鉴定：用于损伤时间推断、组织种属来源鉴定以及某些特定死因的确认。

检测方法

石蜡切片制备：将组织经固定、脱水、透明、浸蜡后包埋成蜡块，并用切片机切成薄片。

脱蜡与水化：将切片依次放入二甲苯和梯度乙醇中，以去除石蜡并使组织复水，为后续染色做准备。

抗原修复：采用热诱导或酶消化法，暴露因固定而被封闭的抗原表位，是实验成功的关键步骤。

内源性过氧化物酶阻断：使用过氧化氢溶液孵育切片，消除组织内源性过氧化物酶的活性，降低背景染色。

血清封闭：用正常非免疫动物血清孵育，封闭组织中的非特异性结合位点，减少非特异性染色。

一抗孵育：滴加针对目标抗原的特异性一抗，使其与组织中的抗原特异性结合。

二抗孵育：滴加带有标记物（如酶或荧光素）的二抗，二抗能特异性识别并结合一抗。

显色反应：加入显色底物（如DAB），在标记酶（常用HRP）催化下产生不溶性的有色沉淀，使抗原位置可视化。

复染：使用苏木精等染料对细胞核进行对比染色，使组织结构更清晰。

封片与观察：切片经脱水、透明后，用中性树胶封固，置于光学显微镜下观察并分析结果。

检测仪器设备

石蜡包埋机：将脱水透明后的组织浸入熔化的石蜡中并包埋成块，便于长期保存和切片。

石蜡切片机：将组织蜡块切割成厚度为3-5微米的连续薄片，是制备高质量切片的核心设备。

摊片机与烤片机：将切下的蜡片在水中展平，然后贴附到载玻片上并烘干，防止脱片。

高压锅或微波炉：用于热诱导抗原修复，通过高温高压或微波加热打开抗原表位。

免疫组化笔：一种疏水笔，用于在组织周围画圈，防止抗体溶液流散，节省试剂。

湿盒：一个密闭的保湿容器，用于孵育抗体时保持切片湿润，防止液体蒸发干燥。

移液器与枪头：用于精确量取和滴加各种试剂、抗体及缓冲液。

光学显微镜：观察染色结果的基本工具，用于分析阳性信号的定位、强度和分布。

全自动免疫组化染色仪：可自动化完成脱蜡至复染的全过程，提高染色的一致性和通量，减少人为误差。

成像系统与图像分析软件：包括显微镜摄像头和专用软件，用于采集数字图像并进行半定量或定量分析。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。