免疫组织化学染色检测

检测项目

肿瘤标志物检测：用于鉴定肿瘤细胞来源、分型及预后评估，如CK、EMA等上皮性标志物。

激素受体检测：如乳腺癌中的雌激素受体和孕激素受体检测，指导内分泌治疗方案选择。

增殖指数检测：通过Ki-67等抗体标记，评估肿瘤细胞的增殖活性，判断肿瘤生长速度。

病毒抗原检测：检测组织样本中是否存在特定病毒抗原，如HPV、EJianCe等，辅助病因诊断。

神经内分泌标志物检测：如Syn、CgA、NSE等，用于神经内分泌肿瘤的诊断与鉴别诊断。

淋巴瘤分型标志物检测：通过CD系列抗体区分B细胞、T细胞淋巴瘤及其亚型，如CD20、CD3等。

间叶组织标志物检测：如Vimentin、Desmin、SMA等，用于肉瘤及肌源性肿瘤的诊断。

错配修复蛋白检测：检测MLH1、MSH2等蛋白表达，筛查林奇综合征及评估结直肠癌预后。

程序性死亡配体-1检测：评估PD-L1在肿瘤细胞或免疫细胞的表达水平，预测免疫治疗疗效。

特异性基因突变蛋白检测：通过替代性抗体检测特定基因突变产物，如IDH1 R132H、BRAF V600E等。

检测范围

肿瘤病理诊断与分型：是IHC最主要的应用领域，用于确定肿瘤的良恶性、组织来源和具体亚型。

预后评估与风险分层：通过检测与侵袭、转移、增殖相关的生物标志物，预测疾病进展和患者生存期。

治疗靶点预测：检测药物作用靶点（如HER2、ALK）或耐药相关蛋白的表达，指导靶向及内分泌治疗。

感染性疾病病原体定位：在组织原位直接显示病毒、细菌等病原体抗原，明确感染部位与类型。

自身免疫性疾病研究：用于检测免疫复合物在组织中的沉积，辅助诊断如狼疮性肾炎等疾病。

神经病理学研究：观察脑组织中异常蛋白的沉积（如β-淀粉样蛋白、Tau蛋白），辅助阿尔茨海默病等诊断。

心血管疾病研究：检测血管壁成分、炎症细胞浸润及血栓成分，研究动脉粥样硬化等病变机制。

发育生物学研究：追踪特定蛋白在胚胎发育不同阶段的时空表达模式，研究器官发生与分化。

药物研发与药效评估：在临床前研究中，评估药物对动物模型组织中靶点蛋白表达的影响。

法医病理学鉴定：用于损伤时间推断、特定物质（如心肌肌动蛋白）的鉴定以及个体识别等。

检测方法

石蜡切片制备：将组织经甲醛固定、脱水透明后浸蜡包埋，切成薄片并裱于载玻片上，是IHC最常用的样本类型。

抗原修复：采用热诱导表位修复或酶消化法，以暴露因固定而被遮蔽的抗原表位，是染色成功的关键步骤。

内源性过氧化物酶阻断：使用过氧化氢溶液处理切片，消除组织内源性过氧化物酶活性，降低非特异性背景染色。

非免疫血清封闭：用正常动物血清孵育切片，封闭非特异性结合位点，减少抗体非特异性吸附。

一抗孵育：将针对目标抗原的特异性一抗滴加在组织切片上，在适宜温度和时间下进行孵育，使其与抗原结合。

二抗孵育：使用与一抗种属匹配且偶联了酶或荧光素的二抗进行孵育，二抗能与一抗特异性结合。

链霉亲和素-生物素复合物法：经典的SABC或LSAB法，利用生物素-亲和素系统的高亲和力与放大效应，提高检测灵敏度。

酶促显色反应：加入DAB或AEC等底物溶液，在二抗所携带的辣根过氧化物酶催化下产生不溶性有色沉淀，使目标位置显色。

复染与封片：使用苏木精等染料对细胞核进行复染以提供背景对比，随后用中性树胶封固切片，便于长期保存与观察。

结果判读与评分：在光学显微镜下观察染色结果，根据着色部位（胞核、胞浆、膜）、强度及阳性细胞百分比进行半定量评分。

检测仪器设备

石蜡切片机：用于将蜡块切割成厚度均匀（通常4-5微米）的连续薄片，是制备高质量切片的核心设备。

摊片机与烤片机：摊片机将切片展开平整，烤片机通过加热使切片牢固附着于载玻片，防止后续步骤中脱落。

全自动免疫组化染色仪：可编程控制整个染色流程（脱蜡至复染），实现标准化、高通量操作，减少人为误差和批次差异。

高压锅或微波炉：用于热诱导抗原修复的常用设备，通过高温高压或微波加热使抗原表位充分暴露。

恒温孵育箱：为抗体孵育提供稳定且精确的温度环境（如37℃），确保抗原抗体反应高效进行。

湿盒：在手动染色过程中用于盛放切片并保持湿润环境的容器，防止抗体溶液蒸发干燥。

光学显微镜：观察和评估染色结果的必备工具，通常配备高分辨率物镜和数码成像系统。

移液器与滴瓶：用于精确加样各种试剂（如一抗、二抗、显色液）和缓冲液的基本手动工具。

玻片染色架与缸：由耐腐蚀材料制成，用于批量处理切片在不同液体试剂（如酒精、二甲苯）中的浸泡与转移。

通风橱或抽风装置：提供局部通风，用于处理二甲苯、甲醛等有毒有害试剂，保障操作人员安全。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。