丝氨酸蛋白酶抑制剂代谢产物分析

检测项目

α1-抗胰蛋白酶（AAT）定量检测：测定血清或血浆中AAT的浓度，是评估AAT缺乏症及相关肺、肝疾病的核心指标。

抗凝血酶III（ATIII）活性测定：评估ATIII抑制凝血酶及Xa因子的能力，是诊断遗传性或获得性易栓症的关键项目。

C1酯酶抑制剂（C1-INH）功能分析：检测C1-INH对靶蛋白酶的抑制功能，用于遗传性血管性水肿（HAE）的确诊与分型。

α2-抗纤溶酶（α2-AP）活性检测：测定其抑制纤溶酶的能力，用于评估纤溶系统状态及某些出血性疾病的诊断。

纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）抗原检测：定量血浆中PAI-1蛋白的含量，与血栓形成风险和代谢综合征密切相关。

PAI-1活性测定：直接评估PAI-1抑制组织型纤溶酶原激活剂（t-PA）的活性水平，比抗原检测更具功能意义。

丝氨酸蛋白酶抑制剂-肽复合物检测：如凝血酶-抗凝血酶复合物（TAT），是体内凝血激活和抑制剂消耗的直接分子标志物。

裂解型Serpin产物分析：检测Serpin被靶蛋白酶裂解后产生的特异性片段，反映体内蛋白酶抑制事件的动态过程。

Latent Serpin构象转化检测：分析从活性形式向潜伏态转化的Serpin比例，与某些病理状态和功能失活相关。

聚合物化Serpin检测：鉴定如Z型AAT等突变Serpin在肝细胞内形成的聚合物，是肝病病理机制研究的重要项目。

检测范围

血浆/血清样本：最常规的检测样本来源，用于绝大多数循环系统Serpin及其代谢产物的分析。

细胞裂解液：用于研究细胞内源性Serpin的表达、加工、储存及聚合物形成。

细胞培养上清：用于分析细胞分泌的Serpin及其在细胞模型中的代谢调控研究。

组织匀浆液：从特定器官或病理组织获取，用于定位研究Serpin的局部表达与功能。

支气管肺泡灌洗液（BALF）：针对肺相关疾病（如AAT缺乏症），直接分析呼吸道局部的AAT水平与功能。

腹水、胸水等体液：在局部炎症或病变情况下，分析体腔积液中的Serpin谱系变化。

重组蛋白样品：在药物研发或机理研究中，对重组表达的Serpin突变体进行生化特性表征。

蛋白酶-Serpin共价复合物：分离并鉴定经共价键稳定的“自杀式”抑制复合物，用于机理研究。

糖基化修饰变体：分析不同糖基化模式对Serpin稳定性、半衰期及活性的影响。

氧化修饰产物：检测甲硫氨酸残基氧化等翻译后修饰导致的Serpin功能失活产物。

检测方法

酶联免疫吸附试验（ELISA）：高灵敏度、特异的免疫学方法，广泛应用于Serpin抗原、复合物及特定片段的定量。

发色底物法活性测定：基于合成肽底物，通过测量残留蛋白酶活性来间接、精准测定Serpin的功能活性。

Western Blotting：用于鉴定Serpin及其代谢产物的分子量、聚合物形成及特异性片段，提供半定量和定性信息。

质谱分析（LC-MS/MS）

高效液相色谱（HPLC）与毛细管电泳（CE）：用于分离和纯化Serpin的不同构象体、聚合物或修饰变体。

表面等离子共振（SPR）：实时、无标记地分析Serpin与蛋白酶相互作用的动力学参数（如结合速率、解离速率）。

圆二色谱（CD）与荧光光谱：用于研究Serpin的二级/三级结构变化、构象稳定性及折叠状态。

等温滴定量热法（ITC）：精确测量Serpin与配体（如蛋白酶、肝素）结合过程中的热力学参数。

交叉免疫电泳：经典方法，可同时显示Serpin的抗原量及其电泳迁移率变化（如复合物形成）。

功能活性电泳（zymography）

SDS-PAGE与Native-PAGE：基础的电泳技术，分别用于分析变性条件下的亚基组成和天然状态下的聚合物。

检测仪器设备

全自动酶标仪：高通量读取ELISA、发色底物法等微孔板实验的光吸收或荧光信号的核心设备。

液相色谱-串联质谱联用仪（LC-MS/MS）

高效液相色谱仪（HPLC）：配备紫外、荧光或二极管阵列检测器，用于蛋白质分离与纯化。

毛细管电泳仪：提供高分辨率的分离能力，特别适用于分析电荷异质性和微小片段。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。