葡糖胺二糖类糖基化程度检测

检测项目

总N-连接糖基化水平：评估蛋白质上所有N-连接聚糖中葡糖胺二糖（GlcNAc-β1,4-GlcNAc）核心结构的总体丰度。

核心岩藻糖基化程度：特异性检测连接于核心GlcNAc上的岩藻糖修饰水平，与抗体ADCC效应密切相关。

平分型GlcNAc修饰：检测核心甘露糖上是否添加了平分型N-乙酰葡糖胺，这是一种重要的修饰类型。

高甘露糖型糖基化比例：定量分析高甘露糖型N-糖链所占的比例，反映蛋白质折叠与内质网相关过程。

杂合型糖基化比例：测定同时含有高甘露糖和复杂型结构的杂合型N-糖链的含量。

复杂型糖基化分支度：评估复杂型N-糖链天线数（如二天线、三天线、四天线）的分布情况。

末端半乳糖基化水平：检测复杂型天线末端半乳糖的覆盖程度，影响蛋白质的血清半衰期。

唾液酸化程度：定量分析糖链末端唾液酸（如N-乙酰神经氨酸）的添加情况，与免疫原性和药代动力学相关。

O-GlcNAc修饰丰度：检测丝氨酸/苏氨酸残基上单个O-连接N-乙酰葡糖胺的动态修饰水平。

游离寡糖谱分析：对从糖蛋白上释放出的游离葡糖胺二糖类寡糖进行全面的定性与定量分析。

检测范围

治疗性单克隆抗体：如利妥昔单抗、曲妥珠单抗等，监测其Fc段糖基化以确保效力和安全性。

重组治疗性蛋白：包括促红细胞生成素（EPO）、凝血因子等，其糖基化直接影响活性和稳定性。

血浆糖蛋白生物标志物：如甲胎蛋白（AFP）、癌胚抗原（CEA）的异常糖基化模式用于癌症诊断。

细胞膜表面受体：分析受体蛋白（如EGFR、VEGFR）的糖基化状态与信号转导和疾病的关系。

病毒包膜蛋白：如新冠病毒S蛋白，其糖基化程度影响病毒免疫逃逸和疫苗设计。

植物源重组蛋白：评估植物表达系统产生的蛋白其特有的木糖、岩藻糖等糖基化修饰。

酵母表达系统产物：检测其产生的高甘露糖型糖基化模式，以符合药用要求。

疾病模型动物组织样本：从动物模型的组织或体液中提取糖蛋白进行糖基化分析。

细胞培养上清液：对培养细胞分泌到上清中的糖蛋白进行实时糖基化监控。

食品与饲料添加剂：如硫酸软骨素、透明质酸等葡糖胺聚糖类产品的质量控制。

检测方法

液相色谱-质谱联用法：将糖链或糖肽分离后通过质谱进行高灵敏度、高分辨率的定性和定量分析。

亲水相互作用色谱法：利用HILIC柱高效分离亲水性各异的游离寡糖或糖肽。

荧光标记-毛细管电泳法：将寡糖进行荧光衍生后，通过CE实现快速、高分离度的分析。

凝集素芯片技术：利用固定有多种凝集素的芯片高通量筛查样品中特定的糖基化结构。

凝集素印迹法：使用特异性识别不同糖结构的凝集素进行Western Blot，半定量分析糖蛋白。

酶联凝集素分析法：类似ELISA，使用酶标凝集素对特定糖结构进行微孔板水平的定量检测。

核磁共振波谱法：提供糖链一级结构和构象的详细信息，是结构解析的金标准方法之一。

释放与衍生化-GC/MS法：将糖链释放、衍生化为挥发性衍生物后，用气相色谱-质谱进行分析。

电化学发光免疫法：结合特异性抗体与凝集素，对血清中特定糖基化蛋白标志物进行超灵敏检测。

多反应监测质谱法：基于LC-MS/MS的MRM模式，对目标糖肽或寡糖进行精准靶向定量。

检测仪器设备

超高效液相色谱仪：用于实现糖链、糖肽或完整糖蛋白的高效、快速色谱分离。

高分辨率质谱仪：如Q-TOF、Orbitrap等，提供精确分子量用于糖基化位点和结构的鉴定。

三重四极杆质谱仪：主要用于MRM定量分析，具有极高的灵敏度和定量准确性。

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪：用于快速分析游离寡糖混合物，获得质谱指纹图谱。

毛细管电泳仪：配备激光诱导荧光检测器，用于高分辨分离荧光标记的寡糖。

荧光检测器：作为HPLC或UPLC的检测器，用于检测荧光标记衍生后的寡糖。

凝集素芯片扫描仪

全自动酶标仪：用于读取ELSA或酶联凝集素分析实验中的吸光度或发光信号。

核磁共振波谱仪：高场NMR用于解析复杂寡糖的精细结构和异头构型。

气相色谱-质谱联用仪：用于分析经衍生化后的单糖组成或部分衍生化的寡糖。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。