上皮通透性测试

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2026-03-16  

本检测系统介绍了上皮通透性测试这一关键技术,涵盖其核心检测项目、广泛的应用范围、主流检测方法及所需仪器设备。文章旨在为研究人员和临床工作者提供关于评估上皮屏障功能完整性方法的全面参考,内容详实,结构清晰。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

跨上皮电阻:通过测量上皮细胞层对电流的阻力,定量评估上皮屏障的紧密性和完整性。

旁路通透性:评估物质通过细胞旁路(即细胞间的紧密连接)进行被动扩散的能力。

跨细胞通透性:检测物质直接穿越细胞膜和细胞质进行转运的通路及其效率。

荧光标记物通量:使用不同分子量的荧光染料(如FITC-葡聚糖)追踪其穿过上皮层的速率和总量。

甘露醇/L-鼠李糖通透性:利用这些不被代谢的糖分子作为探针,特异性评估细胞旁路的被动扩散功能。

辣根过氧化物酶通透性:使用酶标记物HRP,通过检测其酶活性来精确定量大分子蛋白质的通透情况。

细菌/内毒素易位:评估上皮屏障对微生物或其产物(如脂多糖)的阻挡能力,反映屏障的防御功能。

离子选择性:测量上皮层对不同离子(如Na+、Cl-)的通透性差异,反映紧密连接通道的特性。

水通透性:检测水分子跨上皮层的渗透和重吸收能力,与多种体液平衡疾病相关。

药物表观渗透系数:在药物研发中,用于预测候选药物通过肠道等上皮吸收的潜力和速率。

检测范围

胃肠道上皮:主要用于研究肠道屏障功能,评估炎症性肠病、肠易激综合征等疾病的肠道通透性改变。

呼吸道上皮:应用于鼻腔、气管及肺泡上皮,研究哮喘、慢性阻塞性肺病等呼吸道疾病的屏障损伤。

血脑屏障:评估中枢神经系统毛细血管内皮细胞的屏障功能,与神经炎症、脑肿瘤等疾病密切相关。

肾小管上皮:用于研究肾脏对溶质和水的重吸收与分泌功能,以及药物肾毒性评估。

角膜与结膜上皮:在眼科领域,测试眼表屏障完整性,用于干眼症、感染及药物渗透性研究。

皮肤表皮:评估经皮吸收效率及皮肤屏障功能,广泛应用于护肤品、外用药物及皮炎的研究。

膀胱尿路上皮:研究膀胱的屏障功能,与间质性膀胱炎、尿路感染等病理状态相关。

胎盘滋养层上皮:评估母胎界面的物质交换与屏障功能,对研究妊娠并发症至关重要。

血管内皮:虽为内皮组织,但其通透性测试原理相似,广泛用于心血管疾病和肿瘤血管生成研究。

体外细胞模型:应用Caco-2、MDCK等细胞系在Transwell小室中构建的标准化上皮屏障模型进行高通量筛选。

检测方法

使用电压钳/尤斯灌流室:经典的电生理学方法,可同步测量跨上皮电阻和离子流,精度高。

Transwell小室渗透实验:最常用的体外方法,将细胞培养于多孔膜上,通过检测下室探针浓度计算通透性。

荧光光度法:在Transwell实验或组织灌流中,使用荧光分光光度计定量分析荧光标记物的通量。

酶联免疫吸附测定法:用于检测HRP等酶标记物或特定蛋白(如内毒素)的易位量,灵敏度高。

同位素示踪法:使用放射性同位素(如^3H、^14C)标记探针,通过液闪计数进行超微量检测。

体内糖探针试验:给受试者口服不同分子量的糖混合物,通过高效液相色谱法测定尿液中糖回收率来评估肠道通透性。

共聚焦显微成像:利用共聚焦显微镜实时、原位观察荧光探针在上皮层的分布与穿透过程。

电化学阻抗谱:通过施加不同频率的交流电测量电阻抗,可无创、实时监测细胞层的屏障形成与破坏过程。

活体显微成像技术:应用于动物模型,如双光子显微镜可活体观察肠道等深层组织的血管和屏障通透性。

串联质谱分析法:与糖探针试验结合,用于高灵敏度、高特异性地同时定量多种探针分子。

检测仪器设备

尤斯灌流系统:包含灌流室、加热器、气浴和蠕动泵,用于离体组织片的电生理和通透性研究。

跨上皮电阻仪:专用设备,如EVOM系列,配备STX-2电极,可快速、简便地测量细胞单层的TEER值。

Transwell可渗透支持物:为多孔聚碳酸酯或聚酯膜嵌套,是构建体外上皮屏障模型的核心耗材。

荧光分光光度计:用于精确测定样品中荧光染料的发射光强度,从而计算通透系数。

酶标仪:具备荧光、吸光度等多种检测模式,可实现96孔板形式的高通量通透性筛选。

液体闪烁计数器:用于检测放射性同位素标记探针的放射性强度,是同位素示踪法的关键设备。

高效液相色谱仪:配备相应的检测器(如示差折光、电化学检测器),用于分离和定量尿液或血液中的糖探针。

共聚焦激光扫描显微镜:能够进行Z轴断层扫描,三维可视化观察探针在上皮结构中的定位。

实时细胞分析仪:基于阻抗传感技术,可无标记、连续动态监测细胞屏障的阻抗变化。

质谱联用系统:如LC-MS/MS,提供极高的灵敏度和特异性,用于复杂生物样品中多种通透性标志物的精准定量。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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