单向免疫扩散试验

检测项目

免疫球蛋白G：定量测定血清中IgG含量，评估体液免疫功能状态。

免疫球蛋白A：主要用于检测血清、唾液或分泌物中的IgA水平。

免疫球蛋白M：测定血清中IgM浓度，有助于早期感染诊断。

补体C3：定量分析血清补体C3成分，参与炎症和免疫调节评估。

补体C4：测定补体系统C4成分，辅助诊断自身免疫性疾病。

C-反应蛋白：定量检测CRP，作为急性时相反应的重要指标。

转铁蛋白：测定血清转铁蛋白水平，用于营养状况和肝功能评估。

α1-抗胰蛋白酶：定量分析此蛋白酶抑制剂，用于遗传缺陷诊断。

铜蓝蛋白：测定血清铜蓝蛋白浓度，辅助Wilson病的诊断。

前白蛋白：定量检测血清前白蛋白，评估短期营养状况和肝功能。

检测范围

临床血清学诊断：广泛应用于医院检验科，对患者血清蛋白进行定量分析。

免疫缺陷病筛查：用于筛查各类原发性或继发性免疫球蛋白缺乏症。

自身免疫病监测：监测系统性红斑狼疮等疾病中补体成分的动态变化。

炎症状态评估：通过急性时相蛋白的定量，评估机体炎症反应程度。

营养状况评价：通过转铁蛋白、前白蛋白等指标评价患者的营养水平。

遗传代谢病诊断：辅助诊断如α1-抗胰蛋白酶缺乏症等遗传性疾病。

疫苗免疫效果评价：测定疫苗接种后特异性抗体水平的增长情况。

生物制品质量控制：用于定量测定血液制品或重组蛋白制剂中的特定成分。

法医学鉴定：在某些体液斑痕的种属鉴定和个别蛋白分析中有所应用。

基础医学研究：在科研中用于定量分析实验动物或细胞培养上清中的靶蛋白。

检测方法

琼脂糖凝胶制备：将精确定量的特异性抗体与熔化的琼脂糖凝胶均匀混合。

制板与打孔：将混合凝胶倾注于平板，凝固后使用打孔器打出规则加样孔。

标准品稀释：将已知浓度的标准蛋白进行系列倍比稀释，制备标准曲线。

样本预处理：对待测血清样本进行适当稀释，使其浓度落在标准曲线范围内。

精确加样：使用微量加样器将标准品和待测样本准确加入相应加样孔中。

湿盒内扩散：将琼脂板置于湿盒内，在恒温条件下进行抗原的径向扩散。

扩散时间控制：通常在37℃下扩散24至72小时，直至沉淀环完全形成且大小稳定。

沉淀环测量：使用专用测量尺或投影仪，精确测量沉淀环的直径或面积。

标准曲线绘制：以标准品浓度的对数（或算术值）为纵坐标，沉淀环直径（或面积）为横坐标绘制曲线。

结果计算与报告：根据待测样本的沉淀环大小，从标准曲线上查得其浓度，并乘以稀释倍数后报告。

检测仪器设备

恒温水浴箱：用于熔化和恒温保存琼脂糖凝胶，确保其流动性均匀。

精密电子天平：精确称量琼脂糖、缓冲液试剂等，保证凝胶配比的准确性。

磁力搅拌器：在制备抗体-琼脂混合凝胶时，确保抗体均匀分散。

水平调平台：倾注凝胶时确保平板绝对水平，从而获得厚度均匀的凝胶层。

琼脂糖打孔器：用于在凝固的凝胶上打出边缘整齐、大小一致的加样孔。

微量移液器：精确吸取和加样标准品及待测样本，范围通常为10-50微升。

恒温湿盒：为抗原抗体扩散反应提供恒定温度和湿度环境，防止凝胶干燥。

沉淀环测量尺：一种带有放大镜的专用尺，用于直接测量沉淀环的直径。

投影测量仪：可将琼脂板投影放大，更精确地测量沉淀环的直径或面积。

数据处理系统：包括计算机和软件，用于绘制标准曲线、计算样本浓度并输出报告。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。