抑制剂选择性检测

检测项目

激酶抑制选择性谱：评估候选化合物对数百种人类激酶靶点的抑制活性，绘制其选择性指纹图谱。

GPCR受体结合选择性：检测化合物对G蛋白偶联受体超家族中不同亚型受体的结合亲和力差异。

离子通道阻断选择性：分析化合物对电压门控或配体门控离子通道各亚型的特异性阻断作用。

核激素受体调节选择性：测定化合物对雌激素、雄激素、糖皮质激素等核受体亚型的选择性激动或拮抗活性。

表观遗传靶点抑制选择性：评估化合物对组蛋白去乙酰化酶、甲基转移酶、去甲基化酶等表观遗传调控酶家族成员的选择性。

蛋白酶抑制选择性：检测化合物对丝氨酸、半胱氨酸、天冬氨酸或金属蛋白酶等不同类别蛋白酶的选择性抑制。

转运体抑制选择性：分析化合物对神经递质转运体或药物外排泵等膜转运蛋白的选择性抑制能力。

脱靶效应筛选：通过大规模蛋白组学或功能学平台，系统性识别化合物在预期靶点之外的相互作用。

细胞表型选择性验证：在特定信号通路或疾病相关的细胞模型中，验证化合物功能效应的选择性。

物种同源靶点选择性：比较化合物对人类与临床前实验动物物种同源靶点的活性差异，评估转化相关性。

检测范围

激酶组：涵盖AGC、CMGC、TK、TKL、STE、CK1、CAMK等所有主要激酶家族的数百个成员。

GPCR组：包括Class A（视紫红质样）、Class B（分泌素受体）、Class C（谷氨酸受体）等多个家族的受体。

安全药理靶点面板：覆盖hERG通道、CYP450酶、以及一系列与心脏毒性、肝毒性相关的脱靶蛋白。

表观遗传靶点组：包含HDAC I/II/IV类、多种组蛋白甲基转移酶和去甲基化酶等。

磷酸二酯酶家族：涵盖PDE1-PDE11等多个亚型，评估其对环核苷酸信号通路的选择性影响。

细胞周期与凋亡相关靶点：包括Bcl-2家族蛋白、细胞周期蛋白依赖性激酶、凋亡蛋白酶等。

代谢酶家族：涉及细胞色素P450超家族、醛脱氢酶、二氢嘧啶脱氢酶等药物代谢关键酶。

泛素-蛋白酶体系相关酶：包含E1激活酶、E2结合酶、E3连接酶及去泛素化酶等。

病原体与宿主靶点对比：针对抗感染药物，评估其对病原体靶点相对于人类同源物的选择性。

中枢神经系统靶点群：涵盖神经递质受体、离子通道、转运体等与神经系统功能及副作用相关的广泛靶点。

检测方法

放射性配体结合实验：使用放射性标记配体竞争法，定量测定化合物与多种受体的结合常数，是经典的选择性评价方法。

时间分辨荧光共振能量转移：利用TR-FRET技术，在均相体系中高灵敏度地检测激酶、蛋白酶等酶的活性及抑制情况。

表面等离子共振技术：通过SPR实时监测化合物与固定化靶蛋白的结合动力学，获得亲和力与选择性数据。

热迁移分析：基于化合物结合导致蛋白热稳定性变化的原理，用于快速筛选和评估多个靶点的结合选择性。

细胞热位移分析：CETSA在细胞裂解液或活细胞水平评估靶点结合，反映生理环境下的选择性。

高通量质谱分析：结合化学蛋白质组学，如Kinobeads或基于活性的蛋白分析，实现全蛋白质组水平的脱靶作用鉴定。

荧光偏振免疫分析：利用荧光标记肽或配体的偏振光变化，快速检测化合物对酶活性或受体结合的抑制。

AlphaScreen/AlphaLISA技术：基于珠状放大化学发光原理的均相检测方法，适用于高通量筛选和选择性谱分析。

微尺度热泳法：MST通过检测分子在温度梯度中的运动变化，微量测定化合物与纯化蛋白的相互作用亲和力。

计算机模拟与分子对接：通过计算化学方法，预测化合物与不同靶点蛋白的结合模式和能量，辅助解释和预测选择性。

检测仪器设备

多功能酶标仪：具备吸光度、荧光、化学发光、FRET等多种检测模式，是进行高通量生化活性筛选的核心设备。

表面等离子共振仪：如Biacore系列，用于实时、无标记地分析分子间相互作用动力学，精确评估选择性。

高通量质谱仪：如Orbitrap系列质谱与液相色谱联用，用于化学蛋白质组学层面的全谱选择性分析。

等温滴定量热仪：ITC通过精确测量结合过程的热变化，直接获得结合常数、化学计量和热力学参数。

微量热泳动仪：MST仪器用于在溶液环境中快速、微量地测定生物分子相互作用的亲和力与选择性。

实时荧光定量PCR仪：用于检测化合物处理后细胞中特定基因表达变化，间接评估其对通路的选择性影响。

高内涵成像分析系统：通过自动化荧光显微成像与图像分析，在细胞水平进行多参数表型筛选和选择性评估。

自动化液体处理工作站：实现纳升至微升级的精准移液，保障大规模选择性筛选实验的准确性与重复性。

差示扫描量热仪：DSC通过测量蛋白质的热变性曲线，评估小分子结合对蛋白稳定性的影响，用于选择性研究。

核磁共振波谱仪：用于研究小分子与靶蛋白相互作用的原子水平结构信息，从结构角度阐明选择性的分子基础。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。