荧光偏振免疫分析测试

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2026-03-17  

本检测详细介绍了荧光偏振免疫分析(FPIA)技术的原理与应用。FPIA是一种基于抗原抗体特异性反应与荧光偏振原理相结合的均相免疫分析技术,具有快速、灵敏、操作简便等优点。文章系统阐述了该技术的核心检测项目、广泛的应用范围、标准化的检测方法流程以及所需的关键仪器设备,为相关领域的研究与临床实践提供全面的技术参考。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

治疗药物监测(TDM):用于监测患者血液中抗癫痫药、抗生素、强心苷等药物的浓度,指导个体化用药。

滥用药物筛查:快速检测尿液或血液中的大麻、可卡因、安非他命、阿片类等非法药物及其代谢物。

激素水平测定:精确量化甲状腺激素(如T3, T4)、性激素(如睾酮、雌二醇)、皮质醇等内分泌指标。

肿瘤标志物检测:对某些癌症相关的蛋白质或抗原进行定量分析,辅助临床诊断与疗效评估。

传染病抗原/抗体检测:用于病毒性肝炎、艾滋病(HIV)、流感等传染病的病原体抗原或特异性抗体的检测。

心血管疾病标志物:检测如肌钙蛋白I/T、肌红蛋白、B型利钠肽(BNP)等,用于心肌梗死和心力衰竭的辅助诊断。

维生素与微量元素:测定血清中叶酸、维生素B12、铅等物质的含量,评估营养状况或中毒风险。

自身抗体检测:对类风湿因子、抗核抗体等自身免疫性疾病相关抗体进行筛查与定量。

过敏原特异性IgE:定量检测血清中对特定过敏原(如花粉、尘螨)产生的免疫球蛋白E水平。

蛋白质生物标志物:对C反应蛋白(CRP)、尿微量白蛋白等炎症或早期肾损伤标志物进行高灵敏度定量。

检测范围

临床检验科:医院的核心实验室,广泛应用于治疗药物监测、激素检测和急诊毒物筛查。

司法鉴定与毒理学实验室:作为初筛手段,对生物检材中的滥用药物和毒物进行快速批量检测。

疾病预防控制中心(CDC):用于传染病疫情的血清学监测和大规模人群筛查工作。

新药研发与药代动力学研究:在药物开发阶段,用于动物模型或临床试验中药物浓度的动态监测。

食品安全监测:检测动物源性食品中的兽药残留(如抗生素、激素)以及某些生物毒素。

环境监测:应用于水体和土壤中微量有机污染物(如农药、多氯联苯)的免疫学快速检测。

畜牧兽医领域:用于动物疫病诊断、繁殖激素监测以及养殖过程中药物残留的监控。

科研机构与高校实验室:作为基础研究工具,用于分子相互作用、免疫应答机制等课题的研究。

体检中心与第三方检验所:提供高效、准确的肿瘤标志物、激素套餐等高端体检项目的检测服务。

现场快速检测(POCT):经过设备小型化改良后,可在诊所、戒毒所等现场进行即时检测。

检测方法

样本前处理:通常只需对血液、尿液样本进行简单的离心分离,获取血清、血浆或上清液即可上机检测。

试剂复溶与配制:将冻干的荧光标记示踪剂、抗体试剂等按照标准操作规程用缓冲液进行复溶与混合。

加样:使用精密移液器将一定体积的待测样本、试剂加入专用的反应管或微孔板中。

孵育反应:样本中的待测物(抗原)与荧光标记的小分子抗原(示踪剂)竞争结合有限量的特异性抗体,在恒温下孵育数分钟使反应达到平衡。

偏振光激发:反应液被特定波长的偏振光垂直照射,激发荧光标记物发出荧光。

荧光信号检测:仪器分别在垂直和水平两个方向上检测被激发的荧光偏振强度。

偏振度计算:仪器自动计算荧光偏振度(mP值),其值与荧光标记物分子旋转速度成反比,从而与待测物浓度相关。

标准曲线拟合:使用一系列已知浓度的标准品同步检测,以其浓度和对应的mP值绘制标准曲线(通常为对数曲线)。

浓度计算:根据待测样本的mP值,通过标准曲线自动计算并报告样本中待测物的具体浓度。

质量控制:每批次检测均需同时测定质控品,确保其浓度在预设范围内,以保证检测结果的准确性与可靠性。

检测仪器设备

荧光偏振免疫分析仪:核心设备,集成偏振光激发系统、荧光信号检测系统、温控孵育单元和数据处理模块。

精密移液器与加样枪头:用于精确转移微量样本和试剂,是保证加样准确性的关键工具。

低速离心机:用于分离血清、血浆或处理尿液样本,以去除可能干扰检测的颗粒物质。

涡旋混合器:确保试剂与样本在反应前充分混匀,保证反应均一性。

恒温孵育器/水浴箱:部分型号仪器外置,用于在特定温度下进行长时间的孵育反应。

试剂冷藏冰箱:通常为2-8℃冰箱,用于储存未开封的试剂盒、校准品和质控品,保证其稳定性。

样本存储冰箱:包括-20℃或-80℃低温冰箱,用于长期保存待测或已测的生物样本。

计算机与数据处理软件:连接分析仪,用于仪器控制、数据采集、标准曲线拟合、结果计算与报告打印。

专用反应杯/比色杯:一次性使用的透明塑料杯或玻璃杯,用于盛放反应液并进行光学测量。

纯水系统:制备高纯度的去离子水或超纯水,用于配制缓冲液或清洗液,避免水中杂质干扰。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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