芳基甾类化合物生物转化率测定

检测项目

母体化合物浓度测定：定量分析生物样品中未经代谢转化的原始芳基甾类化合物的含量，是计算转化率的基础。

主要代谢产物鉴定与定量：识别并定量生物转化过程中生成的一种或多种主要代谢产物，如羟基化、脱烷基化产物。

葡萄糖醛酸结合物测定：检测芳基甾类化合物经II相代谢后与葡萄糖醛酸结合形成的代谢物，评估结合代谢途径。

硫酸酯结合物测定：定量分析化合物与硫酸基团结合形成的代谢产物，反映另一重要II相结合代谢途径。

氧化代谢产物谱分析：系统分析由细胞色素P450等酶系催化产生的各类氧化代谢物，绘制代谢图谱。

还原代谢产物检测：测定在还原酶作用下，甾体骨架或芳环上特定基团被还原后生成的代谢物。

脱氢代谢产物监测：监测甾体骨架上发生脱氢反应生成的烯键或芳构化产物。

手性代谢产物对映体比例：对于产生手性中心的代谢反应，测定各对映体或非对映体的比例，评估代谢立体选择性。

蛋白结合率测定：评估化合物及其代谢产物与血浆或组织蛋白的结合程度，影响其活性与清除率。

表观渗透系数评估：通过Caco-2细胞模型等测定化合物的表观渗透系数，间接预测其肠道吸收与生物转化潜力。

检测范围

体外肝微粒体温孵体系：涵盖由动物或人肝组织制备的微粒体，用于初步评估肝酶介导的I相氧化代谢。

肝细胞原代培养体系：使用新鲜分离的原代肝细胞（如大鼠、人），提供更完整的I相和II相代谢酶环境。

重组单酶表达系统：利用表达特定细胞色素P450同工酶的重组体系，研究特定代谢途径及酶动力学。

血浆与血清样本：检测给药后血浆/血清中的原型药及代谢物浓度，用于药代动力学研究。

尿液与粪便样本：收集并分析排泄物中的代谢物，用于物质平衡研究与总清除率评估。

胆汁样本：通过胆管插管收集胆汁，专门用于分析经肝胆途径排泄的代谢物，尤其是结合物。

组织匀浆样本：如肝、肾、脑等组织匀浆，评估化合物在靶组织或代谢器官中的分布与局部转化。

Caco-2细胞单层模型：用于研究化合物在肠道吸收过程中的跨膜转运及可能的肠壁代谢。

S9组分温孵体系：使用肝组织S9组分（含微粒体和胞液），同时研究I相和II相代谢反应。

全血或血细胞悬浮体系：评估化合物在血液中可能发生的酶促或非酶促转化。

检测方法

高效液相色谱法：最常用的分离方法，利用反相色谱柱分离化合物及其代谢物，适用于大多数极性范围的分析物。

液相色谱-串联质谱法：高灵敏度、高特异性的金标准方法，通过多反应监测模式准确定量与鉴定复杂生物基质中的痕量成分。

气相色谱-质谱法：适用于挥发性好或经衍生化后具有挥发性的甾类化合物及其代谢产物的分析。

紫外-可见分光光度法：用于测定具有特征紫外吸收的芳基甾类化合物，常用于方法开发或初步浓度测定。

荧光检测法：针对本身具有荧光或可衍生化为荧光产物的化合物，提供高灵敏度的选择性检测。

放射性同位素示踪法：使用14C或3H标记的化合物，通过液体闪烁计数或放射性HPLC检测，用于物质平衡与总代谢研究。

酶联免疫吸附测定法：利用特异性抗体，快速筛查生物样品中特定结构（如母核）的化合物总量。

核磁共振波谱法：主要用于未知代谢产物的结构确证，提供详细的原子连接与立体化学信息。

薄层色谱扫描法：作为一种经典的半定量筛查方法，用于快速比较不同样品中代谢产物的种类与相对含量。

毛细管电泳法：基于分子电荷和大小进行高效分离，特别适用于分析极性大、难以用HPLC分离的代谢结合物。

检测仪器设备

超高效液相色谱仪：提供更高柱效、更快分离速度和更低检测限，是复杂代谢样品分析的核心设备。

三重四极杆质谱仪：LC-MS/MS系统的核心，具备出色的定量能力和选择性，是生物转化率定量的关键仪器。

高分辨质谱仪：如Q-TOF或Orbitrap，用于精确质量数测定和未知代谢物的结构推测与鉴定。

气相色谱-质谱联用仪：配备电子轰击源或化学电离源，用于挥发性代谢物的分离与鉴定。

液体闪烁计数器：用于精确测量放射性同位素标记实验样品中的放射性强度，计算质量平衡。

紫外-可见分光光度计：用于常规浓度测定、酶活性评估及HPLC的在线紫外检测。

荧光分光光度计：提供高灵敏度的检测手段，尤其适用于低浓度荧光物质的定量分析。

恒温振荡培养箱：为体外温孵实验（如肝微粒体、肝细胞）提供稳定且可控的温度与振荡环境。

生物安全柜/细胞培养箱：用于原代肝细胞、Caco-2细胞等活细胞体系的培养与代谢实验，确保无菌环境。

高速冷冻离心机与匀浆器：用于快速分离血浆、制备组织匀浆、沉淀蛋白以及处理各种生物样品的前处理。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。