腺苷二磷酸核糖微流控芯片测试

检测项目

ADP-核糖基化水平定量：精确测量蛋白质上ADP-核糖基团的整体修饰水平，反映细胞内的总体修饰状态。

PARP家族酶活性分析：特异性检测聚ADP-核糖聚合酶（PARP）等家族成员的催化活性，用于药物筛选与功能研究。

单ADP-核糖基化（MARylation）检测：针对单个ADP-核糖单元修饰事件的专门检测，区分于多聚修饰。

多聚ADP-核糖基化（PARylation）检测：检测由多个ADP-核糖单元形成的长链或分支链修饰，评估DNA损伤修复等关键过程。

特异性底物蛋白鉴定：在复杂样本中识别并鉴定被ADP-核糖基化的特定靶蛋白。

修饰位点定位：确定ADP-核糖基团在靶蛋白上的精确氨基酸修饰位点，如精氨酸、谷氨酸等。

修饰链长与分支度分析：分析多聚ADP-核糖链的长度和分支结构，揭示其结构与功能的关联。

去修饰酶（如PARG、ARH3）活性测定：评估水解ADP-核糖基团的去修饰酶的活性，研究修饰的动态平衡。

抑制剂/激动剂药效评估：高通量筛选和评估针对PARP等酶的抑制剂或激动剂的效价与效能。

细胞信号通路关联分析：将ADP-核糖基化事件与特定的细胞信号通路（如DNA损伤应答、炎症）进行关联分析。

检测范围

纯化重组蛋白样品：适用于体外重建的酶-底物反应体系，用于机制研究与酶动力学分析。

细胞裂解液：涵盖多种细胞系或原代细胞的裂解物，用于评估细胞内源性修饰水平与酶活性。

组织匀浆液：适用于从动物或临床组织样本中提取的蛋白混合物，用于病理生理状态研究。

血清/血浆样本：检测循环系统中可溶性PARP酶活性或作为疾病标志物的ADP-核糖基化产物。

单个或少量细胞：利用微流控芯片的高灵敏度优势，实现对极低起始量样本的分析。

药物处理后的动态样本：监测在PARP抑制剂等药物处理不同时间点后，细胞修饰状态的动态变化。

不同物种来源样本：可适配来自人类、小鼠、大鼠等多种模式生物的样本，支持比较医学研究。

DNA损伤诱导样本：专门检测经辐射或化学试剂诱导DNA损伤后触发的ADP-核糖基化响应。

肿瘤细胞与正常细胞对比样本：用于癌症研究中比较肿瘤细胞与对应正常细胞的修饰差异。

亚细胞组分：如细胞核、线粒体等细胞器的提取物，用于研究修饰的亚细胞定位。

检测方法

芯片内酶联免疫吸附法（on-chip ELISA）：在微流道内固定捕获抗体，通过酶标二抗进行比色或化学发光检测。

荧光能量共振转移（FRET）探针法：利用特异性FRET探针，在芯片微反应室内实时监测ADP-核糖基化反应过程。

基于点击化学的标记检测：将带有炔烃或叠氮的ADP-核糖类似物掺入修饰链，通过点击化学反应连接荧光报告基团进行检测。

微流控电泳分离联用：在芯片上集成电泳分离单元，将修饰产物按大小分离后，进行在线检测。

表面等离子体共振（SPR）成像：在芯片传感表面固定抗体或特定结合蛋白，实时无标记监测修饰产物的结合动力学。

微滴数字PCR（ddPCR）原理定量：将反应体系分割成数万个纳升级微滴，对修饰相关的核酸适配体或产物进行绝对定量。

质谱前处理与联用接口：将芯片作为样品预处理平台，纯化富集ADP-核糖基化肽段后，直接联用质谱仪进行鉴定。

电化学传感法：在微电极上修饰识别元件，通过测量ADP-核糖基化反应引起的电流或阻抗变化进行检测。

细胞芯片原位培养与刺激：在芯片微腔内直接培养活细胞，并进行原位刺激与固定，实现单细胞水平的原位检测。

多重检测与编码微球联用：将不同检测目标与荧光编码的微球结合，在微流道中实现高通量、多指标的并行检测。

检测仪器设备

PDMS/玻璃微流控芯片：核心反应载体，通常由聚二甲基硅氧烷（PDMS）或玻璃制成，集成微米级通道与反应腔室。

高精度微量注射泵与压力控制器：用于精确控制皮升至微升级别反应试剂在芯片内的流动与混合。

倒置荧光显微镜及CCD相机：用于对芯片内荧光标记的反应进行实时观察、成像和数据采集。

芯片专用恒温控制台：为芯片上的生化反应提供精确且稳定的温度环境（如37℃）。

微流控芯片化学发光/荧光检测仪：集成化的专用设备，可自动进行芯片定位、试剂注入及光信号读取。

激光共聚焦扫描显微成像系统：用于对芯片内三维结构或厚样本进行高分辨率、高信噪比的荧光层析成像。

芯片-质谱联用接口装置：将微流控芯片的出口与电喷雾电离（ESI）或基质辅助激光解吸电离（MALDI）源耦合的专用接口。

微流控电泳高压电源与检测器：为芯片电泳提供高压电场，并集成紫外或激光诱导荧光（LIF）在线检测模块。

微滴生成与操控系统：用于生成均一纳升微滴，并控制其分裂、融合、孵育及排序，用于数字定量分析。

多通道数据采集与分析工作站：同步采集来自多个传感器（光学、电化学）的信号，并配备专业软件进行数据处理与分析。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。