高碳糖糖缀合物分析

检测项目

单糖组成分析：确定糖缀合物中各种单糖（如葡萄糖、半乳糖、甘露糖等）的种类与摩尔比例。

糖链序列分析：解析糖链中单糖残基的连接顺序，是阐明糖链一级结构的基础。

糖苷键连接方式分析：鉴定单糖之间通过何种羟基连接（如1-4, 1-6连接）以及α/β异头构型。

糖链分支度分析：测定糖链结构的复杂程度，即分支链的数量与位置。

唾液酸含量与连接类型：定量末端唾液酸含量，并区分其连接键型（如α2-3, α2-6）。

岩藻糖化水平分析：测定核心岩藻糖或末端岩藻糖的修饰水平，与生物活性密切相关。

N-糖链与O-糖链鉴定：区分并鉴定通过天冬酰胺（N-连接）或丝氨酸/苏氨酸（O-连接）与蛋白质相连的糖链。

糖链分子量测定：通过质谱技术精确测定完整或酶解后糖链的分子量。

微观不均一性分析：评估同一糖基化位点上存在的不同糖链结构群体，即糖型分布。

游离寡糖分析：对从糖缀合物上释放出的完整寡糖链进行结构表征。

检测范围

治疗性单克隆抗体：分析其Fc区N-糖链（如G0F, G1F, G2F, 岩藻糖基化等），直接影响ADCC/CDC效应。

重组治疗性蛋白质：如促红细胞生成素(EPO)、凝血因子等，其糖基化修饰关乎药效与半衰期。

疫苗糖缀合物：如细菌多糖-蛋白结合疫苗，需分析多糖的链长、连接方式及与载体蛋白的结合情况。

血浆糖蛋白：如免疫球蛋白、转铁蛋白等，其糖基化谱可作为疾病生物标志物。

细胞膜表面糖蛋白与糖脂：研究细胞识别、信号传导过程中关键糖缀合物的结构变化。

植物多糖与糖蛋白：分析中药或植物来源活性成分中的复杂多糖结构。

蛋白聚糖与糖胺聚糖：如硫酸软骨素、肝素等，需分析二糖单元组成及硫酸化模式。

酶解糖肽片段：对经蛋白酶消化后得到的带有糖链的肽段进行位点特异性分析。

合成或半合成糖缀合物：对化学或酶法合成的糖类化合物进行结构确证与质量控制。

生物发酵液或细胞培养上清：在线或离线监测生产过程中目标糖蛋白的糖基化动态变化。

检测方法

高效液相色谱法：利用反相、亲水作用或阴离子交换色谱分离并定量单糖、寡糖或糖肽。

毛细管电泳法：基于电荷和尺寸的高分辨率分离技术，特别适用于带电唾液酸化糖链的分析。

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱：用于快速测定完整蛋白质分子量及初步评估其糖基化修饰。

电喷雾电离质谱：与液相色谱联用，是进行糖型分析和位点特异性表征的核心技术。

串联质谱技术：通过碰撞诱导解离产生特征碎片离子，用于解析糖链序列和连接方式。

亲水作用液相色谱-质谱联用：专门针对强亲水性糖链的高效分离与鉴定联用技术。

凝集素芯片技术：利用多种凝集素的高通量阵列，快速筛选样品中特定糖链结构的存在与丰度。

酶解与化学释放法：使用PNGase F等酶或肼解法将N-或O-连接糖链从蛋白质上特异性释放。

荧光标记与电泳分析：将释放的寡糖用2-AB等荧光染料标记后，进行凝胶或毛细管电泳分析。

核磁共振波谱法：提供原子水平的结构信息，是解析复杂未知糖链立体结构的“金标准”。

检测仪器设备

超高效液相色谱仪：配备多种色谱柱，实现单糖、寡糖及糖肽的高效、快速分离。

高分辨率质谱仪：如Q-TOF、Orbitrap系列，提供精确分子量及多级碎片信息用于结构解析。

三重四极杆质谱仪

三重四极杆质谱仪：主要用于目标糖链或多反应监测模式的精确定量分析。

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪：用于快速筛查完整蛋白质分子量及糖基化异质性。

毛细管电泳仪：通常与激光诱导荧光检测器或质谱联用，用于高分辨率分离带电糖型。

荧光检测器

荧光检测器：作为HPLC或CE的检测器，用于高灵敏度检测荧光标记的衍生化糖类。

折射率检测器

折射率检测器：通用型检测器，用于无紫外吸收的碳水化合物（如多糖）的定量分析。

多角度激光光散射检测器

多角度激光光散射检测器

多角度激光光散射检测器

多角度激光光散射检测器

多角度激光光散射检测器

多角度激光光散射检测器

多角度激光光散射检测器

多角度激光光散射检测器

多角度激光光散射检测器

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。