芸苔类固醇色谱分析

检测项目

芸苔素内酯（BR1）：最早被发现且活性最强的天然芸苔类固醇，是分析检测的核心目标物。

高芸苔素内酯（HomoBL）：芸苔素内酯的同系物，具有相似的生物活性，是重要的检测对象之一。

24-表芸苔素内酯（24-EpiBL）：一种广泛存在且具有高活性的芸苔类固醇，常作为外源施用和代谢研究的标志物。

28-高芸苔素内酯（28-HomoBL）：侧链结构略有差异的芸苔类固醇，其含量变化反映特定的生理状态。

芸苔甾酮（Castasterone, CS）：芸苔素内酯的直接生物合成前体，其与BR1的比例是研究BR代谢的关键指标。

6-脱氧芸苔甾酮（6-DeoxoCS）：芸苔类固醇生物合成途径中的早期中间体，用于解析BRs的生物合成路径。

茶甾酮（Teasterone）：另一种重要的BRs生物合成中间体，其积累可能受环境胁迫影响。

3-脱氢茶甾酮（3-Dehydroteasterone）：茶甾酮的代谢衍生物，参与复杂的BRs转化网络。

油菜素甾醇（Brassinolide）类似物：包括多种人工合成的类似物，检测用于评估其在植物体内的吸收与代谢。

BRs葡萄糖苷结合物：植物体内BRs的失活或储存形式，对其分析有助于理解BRs的稳态调控机制。

检测范围

植物组织提取物：包括叶片、茎杆、根、花、花粉、种子等不同器官，是BRs内源分析的主要样本来源。

土壤与肥料：检测外源添加的芸苔类固醇残留或缓释情况，评估其对环境的影响。

商业制剂与农药：对市售的芸苔素内酯类植物生长调节剂进行质量控制和有效成分鉴定。

细胞培养液：用于研究植物细胞或悬浮培养体系中BRs的合成与分泌动态。

转基因植物材料：分析BRs合成或信号转导相关基因突变体/过表达植株中BRs的含量变化。

受胁迫植物样本：如干旱、盐碱、病虫害等胁迫条件下，植物体内BRs的响应性变化分析。

食品与农产品：监测果蔬等农产品中内源或外源BRs的含量，保障食品安全。

环境水样：检测农业径流或工业废水中可能存在的BRs类物质污染。

药物代谢研究样本：在药理学研究中，追踪外源BRs在动物或人体模型内的代谢产物。

古植物化石提取物：在进化生物学中，尝试检测古代植物残留物中的甾醇信号。

检测方法

气相色谱-质谱联用（GC-MS）：经典方法，需对BRs进行衍生化以提高挥发性和检测灵敏度，适用于痕量分析。

液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）：当前主流方法，无需衍生化，灵敏度高、特异性强，可直接分析多种BRs及其结合物。

高效液相色谱-紫外检测法（HPLC-UV）：适用于含量较高的样品或纯化后的BRs检测，但灵敏度和特异性低于质谱法。

超高效液相色谱（UPLC）技术：与质谱联用，能大幅提高分离速度、分辨率和灵敏度，缩短分析时间。

免疫亲和色谱净化：利用BRs特异性抗体进行样本前处理，能高效去除杂质，显著提高后续分析的准确性。

固相萃取（SPE）前处理：常用C18、硅胶或混合模式柱对复杂样本中的BRs进行富集和纯化。

衍生化技术（如硼烷化、硅烷化）：主要用于GC-MS分析，通过化学修饰改善BRs的色谱行为和质谱响应。

多反应监测（MRM）模式：在LC-MS/MS中采用的核心扫描模式，通过监测母离子和特征子离子对进行准确定量。

同位素稀释法（IDMS）：最准确的定量方法，在样本提取前加入稳定同位素标记的BRs内标，校正提取和离子化过程的损失。

生物测定法辅助验证：利用水稻叶片倾斜、豆苗第二节间伸长等生物活性实验，辅助验证色谱分析结果的生物学意义。

检测仪器设备

三重四极杆质谱仪（QqQ MS）：用于LC-MS/MS分析的核心设备，尤其在MRM定量模式下具有极高的灵敏度和稳定性。

气相色谱-质谱联用仪（GC-MS）：配备电子轰击离子源，是进行BRs衍生化后高分辨定性定量分析的重要工具。

高效液相色谱仪（HPLC）：提供稳定的液相分离系统，常与紫外或荧光检测器联用，或作为质谱的前端分离装置。

超高效液相色谱仪（UPLC）：使用亚2微米填料色谱柱，能承受更高背压，实现快速、高分离度的分析。

自动固相萃取仪：实现SPE前处理过程的自动化，提高样品通量、重现性和操作效率。

氮吹浓缩仪：用于温和地将样本提取液中的溶剂吹干，浓缩目标分析物，避免高温破坏。

高速冷冻离心机：用于低温下快速分离组织匀浆液中的固液成分，防止BRs降解。

真空离心浓缩仪：结合真空和离心力，快速蒸发溶剂以浓缩对热敏感的样品。

超声波细胞破碎仪：高效破碎植物细胞壁，充分释放胞内BRs，提高提取效率。

分析天平（万分之一）：精确称量样品、内标和标准品，是保证定量结果准确性的基础设备。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。