细胞存活率分析

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2026-03-20  

本检测详细阐述了细胞存活率分析这一核心细胞生物学实验技术。文章系统性地介绍了该分析所涵盖的关键检测项目、广泛的检测范围、常用的多种检测方法以及所需的核心仪器设备,旨在为生命科学研究和生物技术应用领域的从业者提供一份全面且实用的技术参考。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

细胞增殖活性:评估细胞群体在特定条件下的生长和分裂能力,是衡量细胞健康状态的基础指标。

细胞毒性反应:检测外源性物质(如药物、化学品)对细胞的损伤或致死效应。

药物敏感性测试:评估不同浓度或种类的药物对特定细胞系存活率的影响,用于药效筛选。

凋亡细胞比例:定量分析程序性死亡细胞在总细胞群中所占的百分比。

坏死细胞比例:定量分析因急性损伤导致的非程序性死亡细胞的比例。

细胞周期分布:分析处于不同细胞周期时相(G0/G1, S, G2/M)的细胞比例,间接反映增殖与死亡状态。

克隆形成能力:评估单个细胞持续增殖并形成细胞集落的能力,反映细胞的长期存活与增殖潜力。

线粒体膜电位:检测线粒体功能完整性,其下降通常是早期凋亡的标志之一。

细胞膜完整性:通过检测细胞膜通透性的改变来判断细胞的存活状态,是区分活死细胞的基本依据。

代谢活性水平:测量细胞内酶活性或代谢产物的变化,间接反映细胞的存活和功能状态。

检测范围

肿瘤细胞系:用于抗癌药物筛选、放疗敏感性研究及肿瘤生物学机制探索。

原代培养细胞:包括从组织分离的肝细胞、神经元、免疫细胞等,用于更贴近生理状态的研究。

干细胞:评估干细胞的活力、增殖潜能以及分化过程中的存活状态。

贴壁生长细胞:如成纤维细胞、上皮细胞等,需要附着于基质才能生长的细胞类型。

悬浮生长细胞:如血液淋巴细胞、某些癌细胞系,在培养液中呈悬浮状态生长。

微生物侵染的细胞:研究病毒、细菌等病原体感染对宿主细胞存活率的影响。

基因编辑后的细胞:评估CRISPR/Cas9等基因操作技术对细胞存活造成的潜在影响。

材料生物相容性测试:检测生物材料、医疗器械浸提液或直接接触对细胞的毒性。

环境污染物评估:分析重金属、有机污染物等环境因子对水生或哺乳动物细胞的毒性效应。

化妆品及添加剂安全评价:在体外水平评估产品成分对皮肤细胞或其他相关细胞的刺激性或毒性。

检测方法

台盼蓝染色排除法:经典方法,利用活细胞膜完整性能排除染料而坏死细胞被染色的原理进行计数。

MTT比色法:通过检测线粒体内琥珀酸脱氢酶将MTT还原为紫色甲臜的能力来反映细胞代谢活性。

CCK-8法:基于水溶性四唑盐被细胞内脱氢酶还原生成橙色甲臜染料,灵敏度高且操作简便。

结晶紫染色法:对贴壁细胞的细胞核进行染色,通过染色强度间接反映贴壁存活细胞的数量。

乳酸脱氢酶释放法:检测培养上清中因细胞膜损伤而释放的LDH酶活性,定量细胞毒性。

Annexin V/PI双染流式术:区分早期凋亡(Annexin V+/PI-)、晚期凋亡/坏死(Annexin V+/PI+)及活细胞(双阴)。

PI或7-AAD单染流式术:利用碘化丙啶等核酸染料不能透过活细胞膜的特性,快速区分死细胞群。

克隆形成实验:将低密度细胞培养较长时间后染色计数集落,评估细胞的长期增殖存活能力。

实时细胞分析技术:采用阻抗法无标记、实时动态监测细胞贴壁、增殖和死亡的全过程。

Caspase活性检测:通过测定凋亡关键执行者Caspase酶的活性变化,特异性反映凋亡进程。

检测仪器设备

倒置光学显微镜:用于日常观察细胞形态、密度及进行台盼蓝染色计数的初步观察。

血球计数板:与显微镜配合,用于手工计数台盼蓝染色后的活死细胞数量。

酶标仪:读取MTT、CCK-8等比色法实验在特定波长下的吸光度值,进行批量定量分析。

流式细胞仪

流式细胞仪:进行Annexin V/PI、PI等荧光染色后的多参数快速分析,实现活、凋、死细胞的精准分群和统计。

荧光显微镜:观察经荧光染料(如Calcein-AM/PI)标记的活死细胞,进行形态学定位和成像分析。

自动细胞计数器:基于图像识别技术,自动快速计数并分析细胞的浓度、活率及粒径分布。

实时细胞分析系统

实时细胞分析系统:集成于培养箱内的特殊微电极板检测系统,可长时间无标记监测细胞状态。

化学发光/荧光检测仪:用于检测基于发光或强荧光信号的细胞活力检测试剂(如ATP检测)。

CO2培养箱:为细胞提供稳定的温度、湿度和CO2浓度环境,是进行所有存活率相关培养的基础设备。

生物安全柜/超净工作台

生物安全柜/超净工作台:提供无菌操作环境,确保细胞处理和分析过程不受污染。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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