代谢清除速率生物分析

检测项目

体外肝微粒体温孵清除率：通过肝微粒体与药物共孵育，测定底物消耗速率，预测药物在肝脏的固有清除率。

肝细胞悬浮液清除率：利用新鲜或冻存的肝细胞进行温孵，评估药物在更接近生理环境的完整细胞中的代谢稳定性。

重组CYP酶代谢表型：使用单一表达的人源重组CYP450同工酶，鉴定介导药物代谢的关键酶亚型。

血浆/全血稳定性：评估药物在血浆或全血中的化学及酶解稳定性，预测其体内循环寿命。

代谢产物鉴定与动力学：定性并定量分析主要代谢产物，并研究其生成与消除的动力学过程。

酶动力学参数测定：通过测定不同底物浓度下的反应速率，计算Km、Vmax等关键酶动力学参数。

时间依赖性抑制评估：检测药物对代谢酶（如CYP450）是否产生时间依赖性的不可逆或准不可逆抑制。

跨物种比较清除率：比较药物在不同种属（人、大鼠、犬等）肝微粒体或肝细胞中的清除率，为临床前物种选择提供依据。

血浆蛋白结合率：测定药物与血浆蛋白的结合程度，用于校正体外清除率数据以预测体内肝清除率。

胆汁排泄潜力评估：通过肝细胞或离体灌流肝模型，评估药物及其代谢物经胆汁排泄的倾向。

检测范围

小分子化学药物：涵盖新化学实体、仿制药及前体药物等在生物体系中的代谢清除行为研究。

生物技术产物：包括多肽、寡核苷酸等生物大分子的降解与清除速率评估。

中药活性成分：对中药提取物中单一或复杂成分的代谢稳定性与清除特性进行分析。

CYP450酶底物与抑制剂：专门针对细胞色素P450酶家族相关药物的相互作用与清除研究。

转运体底物：研究依赖肝细胞膜上转运体（如OATP、P-gp）进行摄取或外排的药物的清除过程。

高首过效应药物：针对口服后经肠道和肝脏发生显著首过代谢的药物进行系统评估。

候选化合物筛选库：在药物发现早期，对大量化合物库进行高通量的代谢稳定性快速筛选。

治疗性抗体与ADC：评估单克隆抗体及抗体偶联药物的靶向与非靶向清除途径及速率。

手性药物对映体：分别研究手性药物不同对映体在代谢清除速率上的立体选择性差异。

环境污染物与毒物：扩展应用于外源性化学物质在生物体内的代谢转化与清除动力学研究。

检测方法

液相色谱-串联质谱法：高灵敏度、高选择性的主流定量方法，用于原型药物及代谢物的浓度测定。

底物探针法：使用特定CYP同工酶的经典探针底物，通过测定其代谢产物生成速率来评估酶活性。

Cocktail探针法：将多种同工酶的探针底物混合温孵，一次性同步评估多种CYP酶的活性及抑制情况。

放射性标记示踪法：使用³H或¹⁴C标记的药物，追踪其质量平衡、代谢产物谱及排泄途径。

高分辨率质谱法：用于未知代谢产物的精确质量数测定与结构推测，辅助代谢产物鉴定。

荧光/化学发光检测法：基于荧光或发光底物的高通量筛选方法，常用于酶活性抑制的初步筛选。

蛋白质沉淀-液质联用法：快速处理生物样本（如血浆、孵育液），结合LC-MS/MS进行高通量分析。

固相萃取富集法：对低浓度代谢物进行选择性富集与纯化，提高检测灵敏度。

稳定同位素标记内标法：使用氘代或¹³C标记的内标物质，极大提高定量分析的准确度和精密度。

体外-体内外推法：整合体外清除率、蛋白结合率等数据，通过数学模型预测体内的肝清除率及血药浓度-时间曲线。

检测仪器设备

三重四极杆质谱仪：进行MRM定量分析的核心设备，具备高灵敏度和宽线性范围。

高分辨率飞行时间质谱仪：用于精确质量测定和代谢产物谱的全面扫描分析。

超高效液相色谱仪：提供快速、高效的色谱分离，缩短分析时间并提高分离度。

自动液体处理工作站：实现温孵实验中的加样、稀释、转移等步骤自动化，提高通量和重现性。

恒温振荡培养箱

恒温振荡培养箱：为肝微粒体、肝细胞等体外温孵实验提供精确控制的温度及振荡环境。

细胞培养系统：用于原代肝细胞的分离、培养以及永生化肝细胞系的维持培养。

液体闪烁计数器：用于检测放射性标记实验中样本的放射性强度，进行质量平衡研究。

多功能酶标仪

多功能酶标仪：可进行吸光度、荧光和化学发光检测，适用于基于光学原理的高通量筛选实验。

-80°C超低温冰箱

-80°C超低温冰箱：长期稳定保存肝微粒体、肝细胞、重组酶及生物样本的关键设备。

氮气吹干浓缩仪

氮气吹干浓缩仪：用于生物样本前处理过程中萃取液的快速浓缩与定容。

生理参数模拟灌流系统

生理参数模拟灌流系统：用于离体肝脏或肠段灌流实验，模拟体内血流和生理环境研究清除过程。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。