葡聚糖凝胶色谱分析

检测项目

分子量测定：通过标准曲线，精确测定蛋白质、多糖等生物大分子的表观分子量或分子量分布。

聚合度分析：用于测定葡聚糖、纤维素等多糖类物质的聚合度及其分布情况。

蛋白质纯化：将目标蛋白质与杂蛋白、盐类或其他小分子物质进行分离和脱盐。

寡糖分离：依据糖链长度的差异，分离和收集不同聚合度的寡糖片段。

抗体片段分析：分离和分析抗体的Fab、Fc片段或评估抗体聚合体。

病毒与亚基分离：分离完整的病毒颗粒与其蛋白亚基，或研究病毒组装过程。

核酸片段分析：分离不同长度的DNA或RNA片段，如PCR产物纯化。

高分子聚合物表征：分析合成高分子材料的分子量分布及均一性。

复合物解离研究：研究蛋白质-蛋白质或蛋白质-核酸复合物的形成与解离状态。

样品脱盐与缓冲液置换：快速去除样品中的盐分，并将其置换到所需的缓冲体系中。

检测范围

生物制药领域：单克隆抗体、重组蛋白、疫苗、胰岛素等生物制品的纯度分析与质量控制。

食品科学与工程：功能性多糖（如β-葡聚糖）、食品胶体、蛋白质的分子特性研究。

基础生化研究：酶、激素、血浆蛋白、细胞因子等生物活性分子的分离与表征。

临床诊断样本：血清、尿液等体液中特定蛋白或代谢物的分离分析。

多糖化学研究：肝素、透明质酸、壳聚糖等各种天然与改性多糖的结构分析。

环境科学领域：水体或土壤中溶解性有机质（DOM）的分子量分布研究。

合成高分子工业：聚乙烯醇、聚乙二醇等水溶性聚合物的质量监控。

核酸研究领域：质粒DNA纯化、寡核苷酸合成产物的分离。

酶工程与发酵工程：发酵产物中目标酶或代谢产物的分离纯化过程监控。

材料科学：水凝胶、纳米材料等新型材料的组分分析与尺寸排阻研究。

检测方法

柱色谱法：将葡聚糖凝胶填充于色谱柱中，利用重力或低压进行样品分离的传统方法。

高效液相色谱法（HPLC-SEC）：采用高压泵驱动流动相，实现快速、高分辨率的分子量分离与分析。

标准曲线法：使用已知分子量的一系列标准品绘制洗脱体积-对数分子量标准曲线，用于未知样品测定。

分配系数（Kav）计算法：通过计算样品在凝胶内的分配系数，进行精确的分子尺寸比较。

紫外检测法：在280nm或214nm波长下在线检测具有紫外吸收的蛋白质、核酸等样品。

示差折光检测法：通过测量溶液折射率变化来检测无紫外吸收的样品，如多糖、聚合物。

多角度激光光散射联用法（SEC-MALS）：与光散射检测器联用，无需标准品即可直接测定绝对分子量。

在线粘度检测联用法（SEC-VIS）：联用粘度计，可同时测定分子量和分子结构信息（如支化度）。

荧光检测法：对于具有天然荧光或经荧光标记的样品，采用荧光检测以提高选择性和灵敏度。

电导检测法：在脱盐或缓冲液置换过程中，通过电导变化监控盐分的洗脱情况。

检测仪器设备

凝胶色谱柱：填充有Sephadex、Sephacryl等系列葡聚糖凝胶的专用分离柱，是核心分离部件。

高效液相色谱仪（HPLC）：提供稳定的高压输液系统，用于驱动流动相完成SEC分离。

紫外-可见光检测器：最常用的在线检测器，用于检测蛋白质、核酸等在特定波长下的吸收。

示差折光检测器（RID）：通用型浓度检测器，适用于所有与流动相折光率不同的化合物。

多角度激光光散射检测器（MALS）：与SEC联用，用于测定大分子的绝对分子量、半径和构象。

在线粘度计：测量溶液的特性粘度，与SEC联用可研究高分子在溶液中的流体力学体积和结构。

自动进样器：实现样品的高通量、高重复性自动进样，提高分析效率与准确性。

馏分收集器：按时间或体积自动收集经色谱柱分离后的组分，用于后续离线分析或制备。

色谱数据工作站：用于控制仪器运行、采集数据、处理图谱并计算分子量及相关参数。

脱气装置：用于在线或离线去除流动相中的溶解气体，防止在系统和检测器中产生气泡干扰。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。