芸苔类固醇酶联免疫

检测项目

芸苔素内酯（BR）总量：检测样本中所有芸苔素内酯类物质的总体含量，反映总活性水平。

24-表芸苔素内酯：针对24-表芸苔素内酯这一特定高活性异构体进行定量分析。

28-高芸苔素内酯：特异性检测28-高芸苔素内酯的含量，常用于评估外源施用效果。

油菜素甾酮：检测芸苔类固醇合成途径中的关键前体物质油菜素甾酮。

6-脱氧油菜素内酯：测定芸苔类固醇生物合成中间体6-脱氧油菜素内酯的浓度。

茶甾醇：对另一种天然存在的芸苔类固醇——茶甾醇进行特异性定量。

芸苔类固醇葡萄糖苷结合物：检测与葡萄糖苷结合的芸苔类固醇形式，研究其代谢与储存。

芸苔类固醇脂肪酸酯结合物：测定与脂肪酸酯化的芸苔类固醇，了解其失活或运输形态。

抗体交叉反应率验证：评估所用抗体对其他类似甾醇结构的识别程度，确保检测特异性。

样本基质效应分析：评估复杂样本基质对免疫检测准确性的影响，并进行校正。

检测范围

水稻叶片与茎秆：监测水稻不同生长阶段及胁迫条件下内源芸苔类固醇的动态变化。

拟南芥幼苗整体：用于植物分子生物学和遗传学研究，分析突变体或转基因植株的激素水平。

大豆种子与豆荚：研究芸苔类固醇在豆科植物种子发育和产量形成中的作用。

水果（如葡萄、草莓）：检测果实发育、成熟及采后过程中芸苔类固醇的含量变化。

蔬菜（如黄瓜、番茄）：评估蔬菜作物生长发育、抗逆性与激素含量的关系。

商用植物生长调节剂：定量检测市售芸苔素内酯类植物生长调节剂产品的有效成分含量。

有机肥料与土壤提取液：监测肥料及土壤中可能存在的芸苔类固醇残留或添加成分。

细胞培养悬浮液：应用于植物细胞培养体系，研究激素对细胞分裂和分化的影响。

加工农产品：检测茶叶、中药材等加工农产品中的天然芸苔类固醇活性物质。

环境水样（灌溉水）：监控农业灌溉水中芸苔类固醇类植物生长调节剂的残留情况。

检测方法

直接竞争ELISA法：将抗原直接包被于微孔板，加入样本和酶标抗体进行竞争结合，操作简便快捷。

间接竞争ELISA法：先将抗原包被，样本中的目标物与包被抗原竞争结合有限的一抗，再通过酶标二抗显色，灵敏度通常更高。

样本前处理（提取）：采用甲醇、乙醇或缓冲液对植物组织进行匀浆和提取，释放目标激素。

样本纯化（固相萃取）：使用C18固相萃取柱等方法去除样本中的色素、脂质等干扰杂质。

标准曲线制备：用已知浓度的芸苔类固醇标准品梯度稀释，建立吸光度值与浓度的对数函数关系。

质量控制（加标回收）：在空白或已知样本中添加标准品，计算回收率以评估方法的准确度。

交叉反应性测试：使用结构类似物测试抗体特异性，计算交叉反应率，确认方法的选择性。

板内与板间精密度实验：通过重复测定同一批次和不同批次的样本，计算变异系数，评估方法的重复性。

检测限与定量限确定：通过测定空白样本确定方法能可靠检出和定量的最低目标物浓度。

数据计算与分析：使用四参数逻辑斯蒂曲线拟合标准曲线，根据样本吸光度值计算其浓度。

检测仪器设备

酶标仪（微孔板读数仪）：核心检测设备，用于读取酶联免疫反应后在特定波长（如450nm）下的吸光度值。

台式高速冷冻离心机：用于低温快速离心，分离样本提取液中的固体残渣，保证上清液澄清。

组织研磨仪或匀浆器：用于快速、充分地将植物组织研磨破碎，释放细胞内含物。

氮吹仪或真空浓缩离心机：用于温和地浓缩或吹干样本提取液，以便复溶或进行后续衍生化。

固相萃取装置：提供负压环境，用于对样本提取液进行纯化和富集的前处理操作。

精密电子天平（万分之一）：精确称量植物组织样本、化学试剂和标准品。

pH计：精确配制和校准实验所需的各类缓冲溶液，确保反应体系酸碱度稳定。

多通道移液器：用于快速、准确地向微孔板中加入试剂、标准品和样本，提高效率与精度。

恒温培养箱或水浴锅：为酶联免疫反应的孵育步骤提供稳定且精确的温度环境（如37℃）。

超纯水系统：制备实验全过程所需的电导率极低的超纯水，避免水中杂质干扰实验结果。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。