圆二色谱分子量分析

检测项目

蛋白质分子量估算：通过远紫外CD光谱与已知标准蛋白谱图库对比，初步估算蛋白质的表观分子量。

蛋白质二级结构含量分析：定量分析蛋白质中α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规卷曲等二级结构的相对含量。

蛋白质折叠状态评估：判断蛋白质样品是处于天然折叠状态、部分折叠还是完全去折叠状态。

蛋白质聚集倾向监测：通过CD信号的变化，监测蛋白质在特定条件下是否发生聚集，聚集常导致信号衰减或失真。

蛋白质热稳定性分析：通过监测CD信号随温度的变化，测定蛋白质的熔解温度（Tm），评估其热稳定性。

核酸分子构象鉴定：区分DNA或RNA是A型、B型还是Z型构象，以及是否存在G-四链体等特殊结构。

蛋白质-配体相互作用：通过观察加入配体前后CD光谱的变化，定性分析结合事件及可能引起的构象变化。

手性小分子绝对构型确定：利用近紫外/可见CD光谱，辅助确定手性有机小分子的绝对立体构型。

蛋白质化学变性研究：通过滴定变性剂（如尿素、盐酸胍）并记录CD光谱变化，研究蛋白质去折叠过程。

动力学过程监测：利用停流CD附件，监测蛋白质折叠/去折叠、酶催化反应等快速动力学过程。

检测范围

可溶性球状蛋白质：适用于分析在溶液中呈单分散状态的各类功能性和结构性蛋白。

膜蛋白与去垢剂复合物：在合适去垢剂存在下，可研究膜蛋白的二级结构及稳定性。

多肽与寡聚肽链：适用于研究合成或天然短肽的结构倾向性及分子识别过程。

双链DNA与RNA：用于分析不同序列、长度及环境下的核酸双螺旋结构特征。

单链核酸与特殊结构：可研究具有复杂高级结构的核酸，如G-四链体、i-Motif和三链核酸。

糖蛋白与蛋白多糖：在远紫外区主要反映蛋白质部分的结构，近紫外区可能包含糖链贡献。

手性有机药物分子：适用于具有生色团的手性药物分子，用于构型分析和纯度检查。

手性配位化合物：可用于研究金属中心具有手性环境或配体本身为手性的配合物。

淀粉样纤维前体蛋白：监测蛋白质从天然态向淀粉样纤维转化过程中二级结构的剧烈转变。

病毒衣壳蛋白组装体：研究大型蛋白复合物或病毒颗粒的总体二级结构组成。

检测方法

静态远紫外CD扫描：在180-250 nm波长范围扫描，是获取蛋白质二级结构信息的最核心方法。

静态近紫外CD扫描：在250-350 nm波长范围扫描，用于探测蛋白质三级结构中芳香氨基酸残基的不对称环境。

滴定实验法：向样品中逐步加入配体、变性剂或改变pH，通过系列CD光谱研究相互作用或稳定性。

热变性扫描法：在固定波长下监测CD信号随温度升高的变化，绘制热变性曲线，计算Tm值。

变性剂诱导变性法：在固定波长下监测CD信号随变性剂浓度增加的变化，绘制化学变性曲线。

时间分辨CD光谱法：使用停流混合装置，在毫秒级时间尺度上捕捉快速构象变化过程的光谱。

浓度依赖测量法：测量不同浓度下的CD光谱，用于评估蛋白质自聚集或寡聚化对结构的影响。

同步辐射圆二色谱：利用同步辐射光源的高强度，将检测波长延伸至真空紫外区（低至~160 nm），获得更丰富信息。

振动圆二色谱：检测红外光区的振动CD信号，提供与电子CD互补的立体化学和构象信息。

磁圆二色谱：在外加磁场下测量，特别适用于研究含有顺磁中心的蛋白质和金属蛋白。

检测仪器设备

常规圆二色谱仪：配备氙灯或氘灯光源、单色仪、光弹性调制器和光电倍增管检测器，是基础研究主力设备。

配备温控单元的CD仪：集成帕尔贴温控或多功能样品池，用于进行精确的温度依赖性实验。

停流圆二色光谱附件：快速混合装置与CD仪联用，用于研究快速动力学过程，混合时间可达毫秒级。

微量样品池与流通池：适用于样品量有限的场景，如微量体积样品池或与色谱联用的流通池。

高通量自动进样器

高通量自动进样器：可实现多个样品的自动连续测量，大幅提升筛选实验的效率。

压力跳变或温度跳变附件：与CD检测联用，用于研究高压或快速变温条件下的蛋白质折叠动力学。

同步辐射圆二色光束线：依托同步辐射装置，提供高强度、可延展至真空紫外区的偏振光，用于高分辨率结构分析。

振动圆二色谱仪：基于傅里叶变换红外光谱仪改造，配备特殊的光弹性调制器，用于测量振动CD信号。

磁圆二色谱仪

磁圆二色谱仪：在常规CD仪样品室增加超导磁体，能够施加高强度磁场进行MCD测量。

在线纯化-CD联用系统：将高效液相色谱或毛细管电泳与CD检测器在线连接，实现分离后立即进行构象分析。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。