发酵菌丝体多糖含量测定

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2026-03-25  

本检测详细阐述了发酵菌丝体多糖含量测定的技术体系。文章系统性地介绍了该检测领域的关键项目、适用范围、主流分析方法以及所需的仪器设备,旨在为相关领域的科研人员与质量控制人员提供一份全面、实用的技术参考指南。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

总多糖含量测定:测定样品中所有可溶性多糖的总量,是评价菌丝体发酵产物质量的基础指标。

β-葡聚糖含量测定:特异性测定具有生物活性的β-构型葡聚糖的含量,常用于药用真菌评价。

α-葡聚糖含量测定:测定以α-糖苷键连接的多糖含量,如淀粉、糖原等。

还原糖含量测定:测定样品中游离的还原性单糖或寡糖含量,用于监控多糖水解程度或发酵底物残留。

糖醛酸含量测定:测定多糖分子中糖醛酸(如葡萄糖醛酸)的含量,常见于酸性多糖。

蛋白质含量测定:测定与多糖可能结合的蛋白质含量,评估糖蛋白复合物或杂质水平。

灰分测定:测定样品经高温灼烧后的无机物残留,评估多糖产品的矿物杂质含量。

水分测定:准确测定样品的水分含量,用于计算多糖的干重基础含量。

多糖分子量分布:分析多糖组分的分子量大小及其分布范围,与生物活性密切相关。

单糖组成分析:测定构成多糖的各单糖种类(如葡萄糖、甘露糖、半乳糖等)及摩尔比例。

检测范围

食用真菌菌丝体:如灵芝、香菇、云芝、灰树花等通过液体或固体发酵获得的菌丝体。

药用真菌菌丝体:如冬虫夏草、茯苓、猪苓等具有药用价值的发酵菌丝体。

发酵液上清液:发酵结束后离心分离得到的液体部分,含有胞外多糖。

菌丝体破碎提取液:经物理或化学方法破碎菌丝体后提取的胞内多糖溶液。

粗多糖产品:经过初步分离沉淀得到的含有一定杂质的多糖粗品。

精制多糖产品:经过纯化、脱蛋白、脱色等步骤后的高纯度多糖样品。

真菌发酵功能性食品:以真菌菌丝体或其提取物为主要原料的保健食品或特膳食品。

真菌源饲料添加剂:应用于畜牧养殖业,以发酵菌丝体为基料的添加剂产品。

发酵过程监控样品:在发酵不同时间点取样,用于监控多糖的积累动态。

不同工艺对比样品:比较不同发酵条件(培养基、pH、温度)或提取工艺对多糖含量的影响。

检测方法

苯酚-硫酸法:最常用的总糖测定方法,基于多糖在浓硫酸作用下水解成单糖,并与苯酚生成有色化合物进行比色测定。

蒽酮-硫酸法:另一种总糖测定方法,蒽酮与糖类在浓硫酸中反应生成蓝绿色化合物,灵敏度较高。

DNS法(3,5-二硝基水杨酸法):主要用于测定还原糖含量,原理是还原糖将DNS还原成棕红色氨基硝基水杨酸。

硫酸-咔唑法:特异性用于测定糖醛酸含量,糖醛酸与咔唑在硫酸中生成紫红色化合物。

酶解法:使用特异性酶(如β-葡聚糖酶)水解特定多糖,然后测定释放的还原糖,用于特定多糖的定量。

高效液相色谱法(HPLC):配备示差折光检测器(RID)或蒸发光散射检测器(ELSD),用于分离和定量不同多糖组分或单糖。

凝胶渗透色谱法(GPC):基于分子大小进行分离,主要用于测定多糖的分子量及其分布。

气相色谱法(GC):将多糖完全酸水解并衍生化为挥发性衍生物后,进行单糖组成和比例的精确分析。

离子色谱法(IC):适用于酸性多糖或含糖醛酸多糖的分析,可分离检测各种单糖和糖醛酸。

重量法:通过乙醇沉淀、脱水干燥后直接称重测定粗多糖含量,方法经典但特异性较差。

检测仪器设备

紫外-可见分光光度计:进行苯酚-硫酸法、蒽酮-硫酸法、DNS法等比色分析的核心设备。

分析天平:精确称量样品、试剂和沉淀物,要求精度至少为万分之一克。

恒温水浴锅:为多糖的水解、显色反应等步骤提供精确且恒定的温度环境。

离心机:用于分离菌丝体与发酵液、沉淀多糖或去除不溶物,需具备控温功能。

真空干燥箱:用于干燥菌丝体样品、多糖沉淀物至恒重,以去除水分。

高效液相色谱仪(HPLC):配备RID或ELSD检测器,用于多糖的定性与定量分析。

气相色谱仪(GC):配备火焰离子化检测器(FID),用于单糖组成分析。

冷冻干燥机(冻干机):对热敏性多糖样品进行温和脱水干燥,以保持其天然结构。

pH计:精确测量和调节样品或反应体系的酸碱度,对许多检测步骤至关重要。

马弗炉:用于高温灼烧样品,进行灰分含量的测定。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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