纯度分级电泳检测

检测项目

蛋白质纯度分析：通过电泳分离评估样品中目标蛋白质相对于总蛋白的占比，是生物制品质量控制的核心指标。

核酸片段纯度检测：评估DNA或RNA样品中是否存在降解、基因组DNA污染或杂质，确保其适用于下游应用。

抗体轻链与重链完整性：检测抗体药物或蛋白样品中轻链和重链的组成是否正确，有无断裂或非特异性条带。

多聚体与聚集物分析：识别和定量样品中由蛋白质聚集形成的高分子量多聚体，这对药物安全性和有效性至关重要。

降解产物鉴定：检测因化学或酶解作用产生的蛋白质或核酸片段，评估样品稳定性。

宿主细胞蛋白残留：在重组蛋白药物生产中，检测并定量来自表达系统（如CHO细胞）的残留宿主蛋白杂质。

内毒素间接关联分析：虽不直接检测内毒素，但可通过电泳图谱异常判断样品是否可能受到严重微生物污染。

糖基化变体谱分析：对糖蛋白的不同糖型进行分离和比较，评估糖基化修饰的均一性。

质粒DNA拓扑结构分析：区分超螺旋、开环和线性等不同构象的质粒DNA，是基因治疗载体质控的关键。

病毒载体衣壳蛋白比例：在腺相关病毒等载体生产中，检测完整衣壳、空壳及部分组装衣壳的比例。

检测范围

重组治疗性蛋白：如单克隆抗体、融合蛋白、细胞因子等，确保其纯度符合药典标准。

疫苗制品：包括亚单位疫苗、病毒样颗粒疫苗等，分析其有效成分的纯度和一致性。

基因治疗载体：如AAV、腺病毒、质粒DNA，检测载体本身的纯度及工艺相关杂质。

诊断试剂核心原料：如抗原、抗体、酶等，高纯度是保证试剂特异性和灵敏度的基础。

细胞培养上清与裂解液：在工艺开发中，快速评估表达水平和初步纯化效果。

层析纯化各阶段样品：监控纯化工艺每一步的去除杂质效果和目标产物回收率。

食品中的过敏原蛋白：检测食品中是否含有微量的特定过敏原蛋白成分。

法医与遗传学样本：对提取的DNA进行纯度评估，确保STR分型等下游分析的可靠性。

基础研究样品：实验室制备的酶、转录因子等研究用蛋白，验证其纯度以满足实验要求。

工业酶制剂：评估用于洗涤、纺织等行业的酶产品的纯度与杂质谱。

检测方法

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳：最常用的变性电泳，根据分子量分离蛋白质，用于纯度评估和分子量测定。

非变性PAGE：在非变性条件下分离蛋白质，保持其天然构象和生物活性，用于分析天然状态下的纯度。

琼脂糖凝胶电泳：主要用于核酸的分离和纯度分析，如DNA/RNA完整性检测和片段大小分析。

毛细管电泳：自动化、高分辨率的微分离技术，适用于蛋白质、核酸的高通量、定量纯度分析。

等电聚焦电泳：根据蛋白质等电点的差异进行分离，特别适用于分析电荷异质性，如脱酰胺变体。

双向电泳：第一向等电聚焦，第二向SDS-PAGE，用于复杂蛋白质混合物的高分辨率分离和纯度筛查。

免疫电泳与免疫印迹：结合电泳分离与抗原-抗体特异性反应，用于鉴定特定杂质或目标蛋白。

凝胶染色与成像分析：采用考马斯亮蓝、银染或荧光染料染色，通过成像系统扫描并进行条带定量分析。

脉冲场凝胶电泳：用于分离超大片段DNA，在微生物分型和大片段DNA纯度分析中应用。

芯片电泳：基于微流控芯片的电泳技术，实现超快速、自动化的核酸或蛋白质纯度分析。

检测仪器设备

垂直板凝胶电泳系统：用于运行SDS-PAGE、非变性PAGE和双向电泳第二向的核心装置。

水平凝胶电泳槽：主要用于琼脂糖凝胶电泳，进行核酸样品的分离。

等电聚焦电泳仪：提供稳定高压电场，用于第一向等电聚焦或单独IEF分析。

毛细管电泳仪：集成自动进样、高压电源、毛细管柱和检测器（如UV、LIF）的自动化分析平台。

凝胶成像系统：包含暗箱、CCD相机和特定光源（白光、紫外、激光），用于捕获凝胶图像并进行数字化。

图像分析软件：对凝胶电泳图像进行条带识别、分子量计算、密度扫描和纯度百分比定量。

高灵敏度染色设备：如荧光染色所需的专用摇床、孵育器及成像用激光扫描仪。

电泳电源：提供稳定可调的直流电压和电流，是驱动所有电泳分离过程的动力核心。

样品制备设备：包括微量移液器、离心机、加热块或水浴锅，用于样品变性、还原和上样前处理。

微流控芯片电泳分析仪：集成化设备，将芯片、流体控制、电泳和检测模块融为一体，实现快速自动化分析。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。