鹿蹄草纯多糖分子量测试

检测项目

绝对分子量测定：测定多糖样品在溶液状态下的绝对平均分子量，是表征其大小的核心参数。

数均分子量（Mn）：基于样品中所有分子链的数量进行统计平均得到的分子量，对低分子量组分敏感。

重均分子量（Mw）：基于分子链的质量进行统计平均得到的分子量，对高分子量组分敏感。

Z均分子量（Mz）：基于更高的质量矩平均，对样品中最大、最重的分子链极为敏感。

分子量分布（MWD）：通过多分散指数（PDI = Mw/Mn）来表征样品分子量的均一性或分散程度。

分子尺寸测定：测量多糖分子在溶液中的流体力学半径（Rh）或回转半径（Rg）。

特性粘度分析：测定多糖稀溶液的粘度，关联其分子量及分子构象信息。

构象与支化度评估：通过分子尺寸与分子量的关系（如Rg与Mw的幂律关系）推断多糖的链构象（球状、无规线团、棒状）和支化程度。

聚合度分析：基于单糖残基的平均分子量，将分子量换算为平均聚合度（DP）。

样品纯度与均一性验证：通过检测信号是否单一、对称，判断多糖样品中是否含有蛋白质、核酸或其他分子量差异大的杂质。

检测范围

鹿蹄草水提粗多糖：适用于从鹿蹄草中经热水提取得到的初级多糖混合物，用于初步评估分子量范围。

鹿蹄草醇沉多糖组分：适用于通过不同浓度乙醇分级沉淀得到的特定多糖组分。

柱层析纯化多糖：适用于经过DEAE纤维素、凝胶层析等色谱方法纯化后的单一或较纯多糖组分。

不同批次鹿蹄草多糖：适用于对比不同产地、采收时间或加工工艺批次样品的分子量一致性。

不同提取工艺多糖：适用于比较超声辅助、酶解、微波等不同提取方法所得多糖的分子量差异。

化学修饰多糖：适用于对鹿蹄草多糖进行硫酸化、羧甲基化、磷酸化等修饰后产物分子量的测定。

酶解降解产物：适用于通过特定酶（如纤维素酶、果胶酶）降解后产生的低分子量寡糖或片段分析。

不同部位来源多糖：适用于分别从鹿蹄草叶片、茎、根等不同部位提取的多糖样品。

稳定性试验样品：适用于经过高温、酸碱、光照等稳定性处理后多糖分子量的变化监测。

对照品或标准品：适用于作为实验室内部对照或标准物质的鹿蹄草纯多糖的定值分析。

检测方法

凝胶渗透色谱-多角度激光光散射联用（GPC/SEC-MALLS）：当前测定多糖绝对分子量和分子尺寸的黄金标准方法，无需标准品，可直接测定。

凝胶渗透色谱-示差折光检测器联用（GPC/SEC-RI）：使用已知分子量的葡聚糖或普鲁兰多糖系列标准品进行校正，测定相对分子量及其分布。

高效液相色谱-蒸发光散射检测器联用（HPLC-ELSD）：适用于无紫外吸收的多糖分析，常与GPC柱联用测定分子量分布。

粘度法：通过乌氏粘度计测定特性粘度，利用Mark-Houwink方程估算分子量，需已知K和α参数。

超速离心沉降分析法：通过分析多糖分子在超强离心力场下的沉降速度来测定分子量和分子形状。

质谱法（如MALDI-TOF-MS）：适用于分子量相对较低（通常小于10万Da）的多糖或寡糖的精确分子量测定及结构分析。

端基分析法：通过化学方法测定多糖链末端还原性基团的含量，从而计算数均分子量（Mn），适用于线性多糖。

渗透压法：基于溶液的依数性原理测定数均分子量（Mn），主要适用于分子量较小的多糖。

小角X射线散射（SAXS）：用于在溶液中测定多糖分子的回转半径（Rg）及整体形状。

动态光散射（DLS）：快速测定多糖分子的流体力学半径（Rh）分布及样品均一性，对微量杂质敏感。

检测仪器设备

凝胶渗透色谱系统（GPC/SEC系统）：核心分离单元，包含输液泵、自动进样器和色谱柱（如TSK-Gel、OHpak系列）。

多角度激光光散射检测器（MALLS）：用于直接测定绝对分子量、回转半径（Rg）的关键检测器。

示差折光检测器（RI Detector）：浓度敏感型通用检测器，用于测定洗脱组分的浓度。

蒸发光散射检测器（ELSD）：通用型质量检测器，适用于无紫外吸收化合物的检测，常作为GPC的检测器。

十八角度激光光散射检测器：MALLS的一种，具有更多检测角度，对大小分子均有高精度测量能力。

在线粘度检测器（Viscometer）：与GPC系统联用，可实时测定特性粘度，提供构象信息。

高效液相色谱仪（HPLC）：作为GPC的输液和分离平台，需配备低剪切力的泵和温控柱温箱。

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪（MALDI-TOF-MS）：用于低分子量多糖和寡糖的精确分子量测定。

动态光散射仪（DLS）：用于快速评估多糖样品的流体力学半径分布和溶液聚集状态。

乌氏粘度计：用于经典粘度法测定多糖特性粘度的玻璃仪器，通常置于恒温水浴槽中使用。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。