循环肿瘤细胞杂交检测

检测项目

CTC计数：对患者外周血中循环肿瘤细胞的绝对数量进行定量分析，是评估肿瘤负荷和预后的基础指标。

上皮源性CTC检测：利用抗上皮细胞粘附分子抗体识别具有上皮表型的CTC，适用于上皮来源的实体瘤。

间质源性CTC检测：检测发生上皮-间质转化的CTC，这类细胞与肿瘤的侵袭、转移密切相关。

混合表型CTC检测：同时识别上皮和间质标志物，用于检测处于转化过程中的CTC亚群。

肿瘤干细胞标志物检测：在CTCJianCe测如CD44、CD133等干细胞相关标志物，评估其自我更新和致瘤潜能。

CTC细胞簇检测：识别并计数由多个CTC聚集形成的细胞团，其转移能力远高于单个CTC。

白细胞共捕获分析：分析与CTC结合或共捕获的白细胞，研究肿瘤细胞与免疫微环境的相互作用。

CTC凋亡检测：通过检测凋亡相关标志物，评估CTC的存活状态，间接反映治疗效果。

CTC增殖活性检测：利用Ki-67等增殖标志物，评估捕获的CTC的增殖能力。

CTC核质比分析：通过形态学分析计算CTC的核质比，作为辅助鉴定和恶性程度评估的参考。

检测范围

乳腺癌：广泛应用于乳腺癌的早期筛查、分期、疗效监控及复发风险预测。

结直肠癌：用于监测结直肠癌术后复发、评估化疗及靶向治疗疗效。

前列腺癌：辅助前列腺癌诊断，特别是对PSA灰区患者的鉴别，并监控去势抵抗性前列腺癌。

肺癌：适用于非小细胞肺癌和小细胞肺癌的病情监测、靶向用药指导及预后评估。

肝癌：作为肝癌，尤其是甲胎蛋白阴性肝癌的辅助诊断和复发监测的补充手段。

胰腺癌：用于胰腺癌的早期发现、手术可切除性评估及术后随访。

胃癌：辅助胃癌分期、疗效评价及检测微小残留病灶。

卵巢癌：用于卵巢癌的疗效评估、复发早期预警和生存预后判断。

膀胱癌：在肌层浸润性膀胱癌中监测转移和评估全身治疗反应。

其他实体肿瘤：该技术原则上可扩展应用于所有可能发生血行转移的实体恶性肿瘤。

检测方法

免疫磁珠负向富集法：使用抗CD45等白细胞共同抗原的磁珠去除血液中大量白细胞，从而富集CTC。

免疫磁珠正向富集法：使用针对上皮细胞粘附分子等肿瘤相关抗原的抗体包被磁珠，特异性捕获CTC。

微流控芯片捕获法：利用微流控芯片的物理特性或表面修饰的抗体，在高流速下高效、自动化捕获CTC。

密度梯度离心法：通过离心分离不同密度的血细胞，初步富集位于单核细胞层的CTC。

膜过滤法：利用CTC与血细胞在大小和变形性上的差异，通过特定孔径的滤膜截留CTC。

荧光原位杂交：使用荧光标记的核酸探针与CTC细胞核内的特定基因序列杂交，实现基因水平的检测。

免疫荧光染色：使用针对细胞角蛋白、白细胞共同抗原等的荧光抗体对富集后的细胞进行染色鉴定。

多重探针杂交策略：同时使用针对多个靶基因（如HER2, EGFR, MET）的探针进行FISH，实现多基因共检测。

染色体着丝粒探针杂交：使用针对染色体着丝粒的探针检测染色体非整倍性，作为CTC的辅助鉴定依据。

RNA原位杂交：检测CTC中特定mRNA的表达，从转录水平分析其特性，如检测间质转化相关转录本。

检测仪器设备

免疫磁分选仪：用于执行免疫磁珠正选或负选过程，自动化实现CTC从全血样本中的分离与富集。

微流控芯片系统：集成样本处理、CTC捕获功能的芯片平台，通常配备精密的流体控制系统。

低速离心机：用于血液样本的预处理、密度梯度离心以及后续洗涤步骤。

荧光显微镜：核心观察设备，用于对完成FISH和免疫荧光染色的CTC进行观察、拍照和初步计数。

全自动荧光扫描系统：可自动扫描整个玻片，快速定位荧光信号，大幅提高CTC的搜寻效率和通量。

杂交仪：提供精确的温控环境，用于控制FISH探针与靶DNA的变性、杂交及洗脱过程。

干式恒温器：用于玻片杂交前的样本变性，以及杂交过程中的保温。

生物安全柜：为样本处理、试剂配制等操作提供无菌无尘的环境，保障操作者和样本安全。

微量移液器：用于精确移取血液样本、缓冲液、抗体、探针等各种微量液体。

图像分析工作站：配备专业图像分析软件，用于对捕获的CTC图像进行多荧光通道分析、形态测量和结果判读。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。