乙酰化相关基因表达测试

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2026-05-18  

本文详细阐述了乙酰化相关基因表达测试的技术体系。文章系统性地介绍了该测试的核心检测项目、广泛的检测范围、主流的分子生物学检测方法以及所需的关键仪器设备,旨在为研究人员提供一份关于乙酰化表观遗传调控基因表达分析的综合技术指南。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

组蛋白乙酰化酶基因表达:定量检测细胞内催化组蛋白赖氨酸残基发生乙酰化修饰的酶(如p300/CBP, PCAF等)的mRNA表达水平。

组蛋白去乙酰化酶基因表达:定量检测负责移除组蛋白乙酰基团的酶(如HDAC1, HDAC6, SIRT1等)的mRNA表达水平,评估去乙酰化活性潜能。

乙酰化阅读器蛋白基因表达:定量检测含有溴结构域等能特异性识别乙酰化赖氨酸的蛋白(如BRD4, BRD2等)的基因表达情况。

转录因子乙酰化状态相关基因:检测如p53, FOXO, STAT3等转录因子本身的乙酰化修饰酶或去乙酰化酶的表达,间接反映其活性调控。

染色质重塑复合物亚基基因:检测与乙酰化协同作用的染色质重塑复合物(如SWI/SNF)关键亚基的基因表达。

核受体共激活因子基因:定量分析如SRC-1, ACTR等具有组蛋白乙酰转移酶活性的核受体共激活因子的表达水平。

代谢相关乙酰化酶基因:检测线粒体或细胞质中与代谢状态密切相关的乙酰化酶(如ACLY, ACSS2)及去乙酰化酶(如SIRT3)的表达。

DNA损伤修复相关乙酰化基因:分析与DNA损伤应答中乙酰化修饰相关的基因,如Tip60(KAT5)等的表达变化。

细胞周期调控蛋白乙酰化相关基因:检测调控细胞周期蛋白(如Cyclins)乙酰化状态的酶类基因表达。

炎症信号通路乙酰化节点基因:定量分析NF-κB等炎症通路中关键蛋白的乙酰化修饰酶(如p300)和去乙酰化酶(如HDAC3)的表达。

检测范围

核心组蛋白修饰酶:涵盖所有经典的组蛋白乙酰转移酶和去乙酰化酶家族成员。

非组蛋白乙酰化调控因子:包括对转录因子、细胞骨架蛋白、代谢酶等进行乙酰化修饰的相关酶类基因。

肿瘤样本:适用于各类肿瘤组织或细胞系,研究乙酰化异常在肿瘤发生发展中的作用。

神经组织与细胞:应用于脑组织或神经元,探究乙酰化在神经发育、退行性疾病中的角色。

免疫细胞:检测T细胞、巨噬细胞等免疫细胞中乙酰化相关基因,解析其在免疫应答中的调控。

心血管系统样本:适用于心肌、血管内皮等组织,研究其在心脏疾病、动脉粥样硬化中的表达谱。

干细胞与发育生物学研究:用于胚胎干细胞、诱导多能干细胞等,分析乙酰化在维持干性和分化中的功能。

药物处理细胞模型:适用于经HDAC抑制剂(如SAHA, TSA)或其他表观遗传药物处理的细胞,评估基因反馈调节。

动物模型组织:可从基因敲除、过表达或疾病模型动物中提取组织进行检测。

临床外周血样本:可分离外周血单核细胞,检测其乙酰化相关基因表达作为潜在生物标志物。

检测方法

实时荧光定量PCR:最常用的方法,通过特异性引物和荧光探针或染料,对目标基因的cDNA进行绝对或相对定量。

逆转录PCR:先将RNA逆转录为cDNA,再进行PCR扩增,通过凝胶电泳半定量分析基因表达差异。

数字PCR:采用微滴或微孔分割技术,进行绝对定量,尤其适用于低丰度表达基因或细微差异的检测。

Northern Blot:经典的RNA检测技术,通过电泳分离RNA并与标记探针杂交,可直观显示mRNA大小和表达量。

核酸原位杂交:在组织切片或细胞爬片上用标记探针进行杂交,在形态学背景下定位特定基因mRNA的表达位置。

基因表达微阵列:使用预置了大量乙酰化相关基因探针的芯片,一次性高通量筛查成千上万个基因的表达谱。

RNA测序:对整个转录组进行测序,能无偏倚地发现所有表达基因,包括未知的转录本和可变剪切体,是研究乙酰化调控网络的强大工具。

分支DNA信号放大技术:一种不依赖PCR的定量方法,通过多级信号放大直接检测细胞或组织裂解液中的mRNA,灵敏度高。

纳米线场效应晶体管生物传感器:新兴技术,将特异性探针固定在纳米线上,通过电信号变化直接、快速检测目标核酸。

液滴微流控单细胞RT-qPCR:在微流控平台上将单个细胞与反应试剂包裹在微滴中,实现单细胞水平的乙酰化相关基因表达分析。

检测仪器设备

实时荧光定量PCR仪:如ABI QuantStudio系列, Bio-Rad CFX系列,用于进行qPCR反应并收集荧光信号。

数字PCR系统:如Bio-Rad QX200微滴式数字PCR系统, Thermo Fisher QuantStudio 3D数字PCR系统。

高通量测序仪:如Illumina NovaSeq, NextSeq系列,用于进行RNA-seq文库的测序。

微阵列扫描仪:如Agilent微阵列扫描仪,用于扫描基因表达芯片上的荧光信号。

核酸提取纯化系统:如Qiagen Qiacube, MagCore全自动核酸提取仪,用于从样本中自动化提取高质量总RNA。

超微量分光光度计:如Thermo NanoDrop,用于快速微量检测RNA的浓度和纯度。

生物分析仪:如Agilent Bioanalyzer, 用于精确评估RNA的完整性(RIN值),确保实验材料合格。

凝胶成像系统:用于对RT-PCR、Northern Blot等实验的凝胶电泳结果进行拍照和分析。

原位杂交仪:提供精确的温控和液体处理,用于自动化完成原位杂交的复杂流程。

液滴微流控生成与检测系统:用于生成均匀的微滴并进行单细胞封装,配合后续的PCR检测。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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