脓液样本核酸纯化试验

检测项目

总核酸提取：从脓液样本中同时提取总DNA和总RNA，用于广谱病原体筛查。

细菌基因组DNA纯化：特异性纯化细菌DNA，用于细菌鉴定、耐药基因检测等。

真菌核酸纯化：针对真菌细胞壁破壁困难的特点，优化提取流程，获取真菌DNA/RNA。

分枝杆菌核酸纯化：采用特殊裂解方法破除分枝杆菌厚脂质细胞壁，提取其核酸。

病毒核酸纯化：从脓液上清或细胞碎片中纯化病毒DNA或RNA，用于病毒病原体检测。

人源基因组DNA去除：通过选择性裂解或酶消化，减少宿主背景DNA，富集病原体核酸。

游离核酸提取：提取脓液中游离的病原体核酸片段，适用于难以培养病原体的检测。

微量核酸富集：针对核酸含量极低的样本，进行浓缩富集，提高检测灵敏度。

DNA片段筛选：通过磁珠或柱式法筛选特定大小的DNA片段，用于宏基因组测序建库。

RNA完整性评估：提取后评估RNA完整性（RIN值），确保适用于逆转录等下游应用。

检测范围

细菌性脓肿：如金黄色葡萄球菌、链球菌、大肠埃希菌等引起的脓肿脓液。

真菌感染脓液：如念珠菌、曲霉菌等深部真菌感染形成的脓性分泌物。

结核性脓疡：由结核分枝杆菌引起的冷脓肿脓液样本。

术后切口感染脓液：外科手术后切口感染部位采集的脓性物质。

深部组织脓肿脓液：包括肝脓肿、肺脓肿、脑脓肿等穿刺获取的脓液。

寄生虫感染脓液：如阿米巴肝脓肿等寄生虫感染相关的脓液。

混合感染脓液：包含两种或以上病原体（细菌、真菌、病毒）的复杂感染样本。

慢性伤口脓液：如糖尿病足溃疡、褥疮等慢性感染伤口的脓性渗出物。

无菌部位疑似感染脓液：从关节腔、胸腔等本应无菌部位抽取的脓性液体。

保存的历史脓液样本：冻存于-80°C或保存在特定保存液中的历史脓液样本。

检测方法

酶裂解法：使用溶菌酶、蛋白酶K等酶制剂温和裂解病原体及宿主细胞。

机械破碎法：采用玻璃珠震荡或研磨，强力破碎真菌孢子或分枝杆菌细胞壁。

磁珠法纯化：利用表面修饰的磁珠特异性吸附核酸，通过磁场分离，自动化程度高。

硅胶膜柱法：核酸在高盐条件下结合硅胶膜，经漂洗后低盐洗脱，纯度高。

酚-氯仿抽提法：经典有机溶剂抽提法，用于去除蛋白质和脂质，适用于复杂样本。

煮沸法：快速热裂解法，适用于对纯度要求不高的快速PCR检测。

吸附柱结合盐析法：结合高浓度盐溶液沉淀杂质，再经柱纯化，平衡速度与纯度。

宿主DNA消化法：在裂解后使用选择性核酸酶消化宿主DNA，富集病原体核酸。

核酸共沉淀纯化：使用乙醇或异丙醇沉淀核酸，并进行洗涤，常用于大量样本制备。

自动化工作站提取：基于磁珠或柱原理的全自动核酸提取仪，实现标准化、高通量操作。

检测仪器设备

生物安全柜：提供无菌操作环境，保护操作者和样本，防止气溶胶污染。

高速离心机：用于样本预处理、沉淀细胞和杂质，以及核酸沉淀步骤。

微型离心机：用于小型离心管中试剂的快速离心收集，配合柱式提取使用。

涡旋振荡器：用于充分混匀样本与裂解液、磁珠等，确保裂解和结合效率。

恒温金属浴/水浴锅：提供精确的孵育温度，用于酶消化、裂解和洗脱步骤。

核酸自动提取仪：集成磁珠法或柱法的自动化设备，实现核酸纯化流程标准化。

分光光度计/微量核酸分析仪：用于定量检测提取核酸的浓度（ng/μL）和纯度（A260/A280）。

电泳系统：通过琼脂糖凝胶电泳评估核酸完整性、是否存在降解及片段大小。

旋涡混合仪：用于剧烈混合粘稠脓液样本，使其与裂解液均匀接触。

负80摄氏度冰箱：用于长期保存原始脓液样本及提取后的核酸产物。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。