药物相互作用体外模型

检测项目

CYP450酶抑制试验：评估候选药物对细胞色素P450酶家族各亚型活性的抑制作用，是预测代谢性相互作用的核心项目。

CYP450酶诱导试验：检测候选药物对肝细胞中CYP450酶表达水平的上调作用，预测其可能降低其他合用药物的疗效。

转运体抑制试验：研究药物对P-糖蛋白、BCRP、OATP等关键药物转运体功能的抑制，评估其对药物吸收、分布的影响。

血浆蛋白结合率竞争试验：测定两种药物共存时对彼此与血浆蛋白结合率的竞争性影响，预测游离药物浓度的变化。

肝微粒体代谢稳定性试验：在肝微粒体孵育体系中加入抑制剂或诱导剂，观察其对原型药物代谢速率的影响。

肝细胞代谢表型分析：利用原代肝细胞或肝细胞系，鉴定参与药物代谢的主要CYP450酶亚型。

时间依赖性抑制评估：区分可逆性抑制与不可逆（时间依赖性）抑制，后者风险更高，需特殊关注。

代谢物鉴定与相互作用：分析主要代谢产物是否具有药理活性或毒性，及其对其他代谢通路的潜在影响。

CYP450酶表型分型：确定特定药物主要由哪种CYP450酶代谢，从而预判其可能受哪些已知抑制剂或诱导剂的影响。

酶动力学参数测定：计算抑制常数Ki、IC50值及诱导倍数EC50等关键参数，用于定量评估相互作用的强度。

检测范围

细胞色素P450酶家族：覆盖CYP1A2、2B6、2C8、2C9、2C19、2D6、2E1、3A4/5等与绝大多数药物代谢相关的主要亚型。

主要药物转运体：包括外排转运体如P-gp、BCRP、MRP2，以及摄取转运体如OATP1B1/1B3、OCT2、MATE等。

II相代谢酶：涉及尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶、谷胱甘肽S-转移酶、磺基转移酶等催化结合反应的酶系。

血浆蛋白结合位点：主要针对人血清白蛋白和α1-酸性糖蛋白这两个主要的药物结合蛋白。

肝药酶诱导剂筛选：通过核受体通路检测对PXR、CAR、AhR等受体的激活作用，预测酶诱导潜力。

肠道代谢与相互作用：评估药物在肠道内由CYP3A4和P-gp共同作用导致的首次效应及相互作用。

血脑屏障转运体：研究药物对血脑屏障上关键转运体的影响，预测其对中枢神经系统药物分布的可能改变。

肾脏排泄转运体：关注肾脏近端小管上皮细胞上的OCT2、MATE等转运体，评估对经肾排泄药物清除的影响。

代谢性药物-草药相互作用：扩展至草药提取物或天然产物成分对肝药酶和转运体的影响评估。

治疗窗狭窄的药物组合：特别关注华法林、地高辛、环孢素等治疗指数窄的药物作为相互作用研究的对象药。

检测方法

CYP450探针底物法：使用特异性探针底物（如睾酮用于CYP3A4），通过测定其特征代谢产物的生成量来评价酶活性。

荧光底物高通量筛选法：利用可被特定CYP450酶代谢产生荧光产物的底物，实现快速、自动化的抑制/诱导初筛。

LC-MS/MS定量分析：液相色谱-串联质谱法是金标准方法，用于准确定量探针底物及其代谢产物浓度，灵敏度高。

Caco-2细胞单层转运模型：用于评价药物对肠道P-gp等转运体的抑制潜力，模拟肠道吸收和相互作用。

原代肝细胞悬浮培养模型：将新鲜分离或冻存的人原代肝细胞用于代谢稳定性、酶诱导及抑制的综合评价。

肝微粒体温孵法：将待测药物与肝微粒体及辅因子共孵育，是进行酶抑制研究和代谢稳定性测试的经典方法。

报告基因检测法：构建包含核受体反应元件的报告基因质粒，转染细胞后检测荧光素酶活性，用于评估酶诱导潜力。

平衡透析法/超滤法：用于测定药物的血浆蛋白结合率及竞争性结合实验，评估蛋白结合位点竞争风险。

膜囊泡转运实验: 使用过表达特定转运体的膜囊泡，直接测定药物对该转运体摄取或外排功能的抑制作用。

<强>TDI（时间依赖性抑制）预孵育实验: 先将待测药物与酶系统预孵育一段时间再加入探针底物，以鉴别机制性抑制。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。