食品中致病菌限量检测

检测项目

食品致病菌限量检测聚焦于七类高风险病原微生物：

沙门氏菌：依据GB 4789.4标准实施五步法检验（预增菌→选择性增菌→分离培养→生化鉴定→血清分型），涉及25g样品三级增菌体系

金黄色葡萄球菌：采用Baird-Parker平板计数法（GB 4789.10）与血浆凝固酶试验双重验证，定量限达10² CFU/g

单核细胞增生李斯特氏菌：执行ISO 11290-1:2017国际标准方法，包含Fraser增菌液两步富集及CHROMagar显色培养基特异性筛选

致泻性大肠埃希氏菌：通过EC肉汤增菌结合PCR毒力基因（stx1/stx2/eae）检测实现O157:H7等致病株鉴别

副溶血性弧菌：采用TCBS琼脂选择性分离（GB 4789.7），3%氯化钠三糖铁斜面特征反应作为初筛依据

克罗诺杆菌属：针对婴幼儿配方食品执行GB 4789.40标准流程，包含改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤（mLST）两步增菌程序

产气荚膜梭菌：基于TSC琼脂的卵黄反应鉴定（ISO 7937:2004），需同步开展硝酸盐还原试验及动力-硝酸盐培养基验证

检测范围

致病菌限量控制覆盖八大类食品基质：

检测方法

现行标准方法体系包含三级验证机制：

传统培养法（基准方法）

预增菌阶段采用缓冲蛋白胨水（BPW）恢复受损细胞活性（37℃±1℃，18h±2h）

选择性增菌使用Rappaport-Vassiliadis培养基（沙门氏菌）或甘露醇氯化物肉汤（金黄色葡萄球菌）进行靶向富集

平板分离采用显色培养基技术（如ChromID Salmonella Elite）提升检出特异性

快速检测技术（确证方法）

实时荧光PCR法：TaqMan探针设计覆盖invA基因（沙门氏菌）、nuc基因（金葡）等特异性标记物

酶联免疫法（ELISA）：基于单克隆抗体的夹心法设计，可于4h内完成96样本高通量筛查

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）：建立4000-20000 Da特征蛋白指纹图谱数据库

全流程自动化系统（AOAC认证方法）

TEMPO®系统实现肠杆菌科48h内自动定量（基于MPN原理的荧光终点法）

Soleris®实时光电监测技术通过比色变化动态追踪微生物代谢过程

VIDAS®仪器整合ELFA技术（酶联荧光分析法），完成单核李斯特氏菌26h快速确认

检测仪器

标准化实验室配置三类核心设备群组：

A类-基础设备组

生物安全柜（Class II A2型）：维持操作区ISO 5级洁净度，面风速0.38±0.025m/s可调模式

恒温培养箱群组：包含25℃±1℃（李斯特氏菌）、37℃±1℃（肠道致病菌）、44℃±0.5℃（耐热大肠菌群）多温区配置方案

高压灭菌器：满足134℃×30min生物灭活周期验证要求，配备三级冷却水循环系统

B类-分析设备组

实时荧光定量PCR仪：配置FAM/HEX/Cy5多通道光学模块，支持熔解曲线分析功能（分辨率≤0.5℃）

全自动微生物鉴定系统：VITEK 2 Compact采用64孔测试卡设计，覆盖197种革兰氏阴性菌数据库条目

酶标仪系统：配备450nm/630nm双波长读取模块，支持四参数logistic曲线拟合算法优化OD值判读精度≤±2%CV值控制要求。

C类-辅助设备组^*注1*

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。