水仙黄条病毒检测

检测项目

病毒粒子形态学观察、核酸提取纯度测定、RNA完整性分析、RT-PCR扩增效率验证、基因序列比对分析、衣壳蛋白电泳分离、WesternBlot特异性验证、ELISA抗体效价测定、病毒载量定量分析、寄主植物病理切片制备、免疫胶体金层析试纸灵敏度测试、透射电镜负染成像、实时荧光定量PCR阈值循环数测定、交叉反应排除实验、样本保存液渗透压校准、引物二聚体干扰评估、内参基因稳定性验证、核酸浓度OD值测定、病毒分离培养活性测试、血清中和试验效价判定、植物组织超薄切片制备、核酸酶污染筛查、扩增产物凝胶电泳分型、生物信息学系统发育树构建、质谱法蛋白分子量鉴定、离心梯度纯化效率评估、样本灭活处理有效性验证、植物汁液澄清度分级评估、低温超速离心机转速校准、实验室环境气溶胶污染监测

检测范围

水仙鳞茎表皮组织、叶片浸出液样本、花梗维管束切片、根尖分生组织培养物、种子胚乳提取物、温室栽培基质浸提液、感染植株汁液离心上清液、嫁接接口愈伤组织样本、昆虫介体唾液腺提取物、机械接种后病斑组织块、温室隔离区空气沉降样本、灌溉水过滤浓缩物组培苗培养基残留物组培苗培养基残留物组培苗培养基残留物组培苗培养基残留物组培苗培养基残留物组培苗培养基残留物组培苗培养基残留物组培苗培养基残留物组培苗培养基残留物组培苗培养基残留物组培苗培养基残留物组培苗培养基残留物组培苗培养基残留物组培苗培养基残留物组培苗培养基残留物组培苗培养基残留物组培苗培养基残留物组培苗培养基残留物组培苗培养基残留物组培苗培养基残留物组培苗培养基残留物组培苗培养基残留物组培苗培养基残留物组培苗培养基残留物组培苗培养基残留物组培苗培养基残留物组培苗培养基残留物组培苗培养基残留物

检测方法

透射电子显微镜法（TEM）：通过磷钨酸负染技术观察病毒粒子形态特征及尺寸参数。
双抗体夹心ELISA法：采用NYSMV特异性单克隆抗体进行抗原捕获与酶标显色定量。
实时荧光定量RT-PCR：设计NYSV-CP基因保守区引物探针体系进行Ct值定量分析。
核酸斑点杂交（Dot-Blot）：用地高辛标记cDNA探针进行膜上核酸杂交显影。
免疫电镜技术（ISEM）：将抗体包被铜网捕获病毒粒子后进行形态学确认。
双向电泳-质谱联用法：分离病毒蛋白组分并通过肽指纹图谱数据库比对鉴定。
生物测定法：采用指示植物汁液摩擦接种观察典型黄条症状发展进程。

检测标准

GB/T35343-2017植物病毒检疫鉴定规程水仙黄条病毒
ISO16140-3:2021分子生物学方法验证通用技术要求
EPPOPM7/113(1)鳞茎类植物病毒诊断协议
SN/T2124-2008进出境种球病毒检疫规范
ASPTB001-2020观赏植物病毒分子检测操作指南
JRAQMS-LS-025实验室生物安全二级防护标准
OIRSAVEG-09中美洲植物检疫参考方法
APFISNTPC-004亚太植保组织认证程序
ISTA7-015国际种子检验协会病毒检测章节
FERAPD00132英国动植物健康局植物病原体操作手册

检测仪器

超速离心机（BeckmanOptimaXE）：用于病毒粒子的梯度密度纯化分离。
实时荧光定量PCR仪（ABIQuantStudio5）：执行TaqMan探针法的核酸扩增与实时监测。
冷冻切片机（LeicaCM1950）：制备厚度5μm的植物组织病理学切片。
全自动酶标仪（BioTekSynergyH1）：完成96孔板ELISA反应的吸光度数据采集。
场发射透射电镜（HitachiHT7800）：配备CCD相机实现纳米级病毒结构成像。
微量分光光度计（ImplenNanoPhotometerN60）：测定核酸提取物的A260/A280纯度比值。
超低温冰箱（ThermoScientificForma900）：长期保存病毒分离株于-80℃环境。
生物安全柜（ESCOAirstreamAC2-4S1）：提供ISOClass3级病原体操作防护。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。