苹果病毒检疫检测

检测项目

苹果茎沟病毒、苹果褪绿叶斑病毒、苹果锈果类病毒、苹果花叶病毒、苹果丛枝植原体、苹果星裂病毒、苹果茎痘病毒、苹果曲叶病毒、苹果皱果类病毒、苹果褐斑病菌毒素、苹果轮纹病菌毒素、苹果炭疽病菌毒素、苹果黑星病菌毒素、苹果根结线虫携带病毒、苹果潜隐病毒复合体、苹果嫁接传播性病原体、苹果蚜虫媒介病毒、苹果花粉传播性病原体、苹果种子带毒率测定、苗木系统性感染筛查、组织培养脱毒效果验证、果园土壤残留病原检测、灌溉水微生物污染分析、农器具交叉污染鉴定、果实表面病原附着量测定、贮藏期病原活性监测、抗病毒药剂有效性评估、转基因植株病毒抗性测试、病毒基因组全序列分析、病原体分离培养鉴定

检测范围

新生嫩叶组织样本、成熟叶片主脉切片样本、一年生枝条韧皮部样本、休眠芽鳞片样本、根系分生组织样本、花器官柱头样本、幼果果柄离层样本、成熟果实表皮样本、砧木嫁接口愈伤组织样本、组培苗茎尖分生组织样本、果园表层土壤样本（0-20cm）、深层土壤样本（20-40cm）、滴灌系统出水口样本、修剪刀具表面拭子样本、育苗基质混合样本、花粉采集器收集样本、蜜蜂授粉携带物样本、蚜虫虫体研磨液样本、叶蝉排泄物样本、果园周边杂草植株样本、包装材料接触面样本、冷藏库空气沉降菌样本、运输车辆厢体内壁拭子样本、商品果蜡膜残留物样本、有机肥发酵产物样本、雨水收集池水样样本、生物防治菌剂载体样本、农药悬浮液沉淀物样本、实验室培养基质空白对照样本

检测方法

双抗体夹心ELISA法：利用特异性抗体捕获目标抗原，通过酶标二抗显色定量分析病原浓度
RT-PCR扩增技术：提取病毒RNA进行反转录扩增，通过电泳图谱判定特异性条带
实时荧光定量PCR：建立标准曲线精确测定病原核酸拷贝数，灵敏度达10copies/μL
核酸斑点杂交法：将待测核酸固定于膜基后与标记探针杂交，适用于混合感染鉴别
电子显微镜负染法：通过超薄切片制备观察病毒粒子形态特征及聚集状态
免疫胶体金试纸条：基于纳米金标记抗体的层析技术实现田间快速初筛
高通量测序技术：采用Illumina平台进行宏基因组分析，覆盖未知病原筛查
生物测定法：利用指示植物嫁接接种观察典型症状表现周期
毛细管电泳分析：分离核酸片段并测定分子量进行基因型分型
质谱蛋白质组学：鉴定病原特征性蛋白标志物建立指纹图谱数据库

检测标准

GB/T35342-2017苹果无病毒母本树和苗木检疫规程
SN/T5359-2021出口苹果苗木检疫处理规范
ISO16140-3:2021微生物学-方法验证-第3部分：植物病原体检测协议
EPPOPM7/98(2)苹果茎沟病毒诊断规程
GB/T36813-2018植物检疫措施准则病毒检测通用要求
NY/T2318-2013苹果无病毒种苗繁育技术规程
ISO22974:2020分子生物学检测方法确认指南
GB/T38581-2020植物病毒实时荧光RT-PCR检测通则
AS5013.15-2006食品微生物学-植物病原体检验方法
JRAQMRA001:2019植物检疫风险定量评估技术规范

检测仪器

全自动核酸提取工作站：整合磁珠法纯化流程，单次处理96个样品并内置防污染系统
荧光定量PCR仪：配置多通道光学模块，支持TaqMan探针与SYBRGreen双检测体系
冷冻切片机：配备CRYO-QC温控系统实现-25℃恒温切片保持组织完整性
超速离心机：最大转速150,000g用于病毒粒子梯度纯化与浓缩
激光共聚焦显微镜：搭载405/488/561/640nm四激光器进行多重荧光原位杂交观察
生物分子相互作用仪：通过表面等离子共振技术实时监测抗原抗体结合动力学
高通量电泳系统：96孔道同步运行完成核酸片段快速分离与定量分析

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。