葡萄黄点病毒快速检测

检测项目

病毒粒子形态观察、核酸类型鉴定、基因组结构分析、外壳蛋白基因测序、血清学特异性检测、分子杂交验证、RT-PCR扩增效率测试、实时荧光定量标准曲线建立、引物特异性验证、探针灵敏度评估、交叉反应排除实验、内参基因稳定性测试、病毒载量定量分析、侵染动态监测、组织分布特征研究、传播途径验证、抗药性基因筛查、突变位点识别、重组事件分析系统发育树构建、寄主范围测定、环境耐受性测试、媒介昆虫携带量测定、潜伏期监测预警模型构建。

检测范围

葡萄叶片病斑组织样本、叶柄维管束提取物、茎段韧皮部切片样本、根系分泌物沉淀物、花序发育期样本果实表皮刮取物嫁接接口愈伤组织组培苗离体材料土壤根际微生物群落灌溉水悬浮颗粒物修剪工具表面残留物蚜虫口针携带物粉虱消化道内容物叶蝉唾液腺提取物农用器械清洗液基质育苗营养液包装材料接触面拭子冷库贮藏环境样本运输车辆厢体采样实验室传毒介质对照品市场流通鲜果抽样进出口检疫截获样本。

检测方法

透射电子显微镜负染法：通过磷钨酸染色直接观察病毒粒子形态特征与聚集状态。
双抗体夹心ELISA：采用单克隆抗体捕获病毒外壳蛋白进行定性/半定量分析。
多重RT-PCR技术：同步扩增GYSV1/2型特异性片段与植物内源基因对照。
纳米孔测序法：基于MinION平台实现混合感染样本的全基因组快速解析。
微滴式数字PCR：通过绝对定量消除PCR抑制剂对结果的影响。
免疫胶体金试纸条：开发田间快速筛查的层析式即时诊断工具。
原位杂交定位技术：结合石蜡切片确定病毒在宿主细胞内的分布特征。
高通量测序验证：采用Illumina平台进行深度测序与变异位点注释。

检测标准

ISO16140-5:2020分子生物学方法验证通用技术要求
GB/T36810-2018植物病毒检测技术规范
SN/T2127-2015进出境葡萄病毒检疫鉴定规程
NY/T1481-2018葡萄无病毒母本树培育技术规程
EPPOPM7/98(2)葡萄黄点类病毒诊断规程
OIV-MA-AS2-07葡萄栽培材料病毒认证方案
AS5013.25-2009食品微生物学检验植物病毒分型
JRAPPQMethod5.021植物病原体分子鉴定程序
T/CVMA41-2020动物源性植物病毒监测指南
DB37/T4099-2020葡萄主要病毒多重RT-PCR检测方法

检测仪器

实时荧光定量PCR仪：ABIQuantStudio系列设备实现Ct值自动分析与熔解曲线判定。
全自动核酸提取工作站：MagMAXCore系统完成96孔板高通量样本处理。
冷冻超薄切片机：LeicaUC7制备50-70nm电镜观察样品。
化学发光成像系统：Bio-RadChemiDocMP捕获Westernblot信号。
生物分子相互作用仪：BiacoreT200测定抗体亲和力常数。
纳米颗粒分析仪：MalvernZetasizer测定病毒纯化产物的粒径分布。
超速离心机：BeckmanOptimaXPN系列完成梯度密度纯化。
全自动酶标仪：ThermoMultiskanSky进行OD450nm吸光度读取。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。